[发明专利]一种水果中类胡萝卜素合成能力的检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种水果生物能力的检测方法，具体而言涉及一种水果中类胡萝卜素合成能力的检测方法。

背景技术

类胡萝卜素是一类重要的天然色素的总称，目前已经发现近800种天然的类胡萝卜素。类胡萝卜素是影响动植物生存以及人类健康的重要物质，类胡萝卜素及其衍生物可以参与人类视觉的形成，提高人体免疫力，减少心血管疾病的风险，以及保障人类的生殖发育等。水果通常具有合成类胡萝卜素的能力，食用水果也是人体获取类胡萝卜素的主要途径之一，准确检测水果中类胡萝卜素的合成能力，对于评价水果对人体的健康功能以及培育水果新品种均具有重要意义。不同水果合成类胡萝卜素的能力不同，有的水果能够大量合成类胡萝卜素并且在果实内不断累积，有的水果虽然有较强的类胡萝卜素合成能力，但是所合成的类胡萝卜素在果实内不断降解，使得累积量较小，而有的水果类胡萝卜素合成能力较弱，果实内类胡萝卜素累积量也较小。这样，当直接对水果进行检测并发现水果内类胡萝卜素含量较小时，往往很难判定是水果本身类胡萝卜素合成能力弱，还是因降解所致，这就为评价水果的类胡萝卜素合成能力带来了困难。针对仅有较少类胡萝卜素累积量的水果，目前还没有一种能够有效地揭示其类胡萝卜素真实合成能力的检测方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种水果中类胡萝卜素合成能力的检测方法，该检测方法能够避免直接测定时因类胡萝卜素降解导致的不利影响，所得结果更能够客观反映水果合成类胡萝卜素的真实能力。

为了实现上述目的，本发明采取以下技术方案：

一种水果中类胡萝卜素合成能力的检测方法，包括如下步骤：

（a）配置混合水溶液和色素提取液，所述混合水溶液中含有质量分数为0.2~0.3%的2-(4-硫代氯苯)三乙胺盐酸盐以及质量分数为2~4%的甘油，所述色素提取液中按质量比含有正己烷：丙酮：无水乙醇=1~3：0.5~1.5：0.5~1.5，并且含有质量分数为0.005~0.02%的2，6-二叔丁基-4-甲基苯酚；

（b）将待检测的水果在所述混合水溶液中浸泡后取出并在室温下避光存放7~15天，然后将果皮与果肉分离，并分别将果皮和果肉在液氮条件下研磨后冻干得到果皮粉末和果肉粉末；

（c）利用所述色素提取液分别提取果皮粉末和果肉粉末内的色素，然后通过高效液相色谱利用番茄红素标准曲线法定量检测番茄红素的含量；

（d）根据番茄红素含量的多少评价水果中类胡萝卜素合成能力的高低。

优选的，所述步骤（c）中，通过高效液相色谱进行检测的色谱条件为：流动相包括A相和B相，A相中按质量比为乙腈：甲醇=3：1，并且含有质量分数为0.01%的2，6-二叔丁基-4-甲基苯酚和0.05%的三乙胺，B相为甲基叔丁基醚，并且含有质量分数为0.01%的2，6-二叔丁基-4-甲基苯酚，流速为1mL/min，色谱柱型号为DevolosilC30，洗脱条件为0-10min：A-B相体积之比95：5；10-19minA-B相体积之比86：14；19-29min：A-B相体积之比75：25；29-54min：A-B相体积之比50：50；54-66min：A-B相体积之比26：74；67min：A-B相体积之比95：5；进样量为5μL；采用二极管阵列检测器，检测波长450nm。

进一步优选的，所述步骤（c）中，在利用所述色素提取液分别提取果皮粉末和果肉粉末内的色素时，分别称取所述果皮粉末和果肉粉末各0.5g于10mL离心管中，每份样品设3次重复，加入5mL所述色素提取液，超声波萃取20min，然后6000g离心10min，将上清液取出，再向装有样品的离心管中加入5mL色素提取液，重复萃取二次，并将上清液合并，然后在真空浓缩仪中浓缩上清液至干燥得到色素；准确吸取150μL甲基叔丁基醚充分溶解所述色素，13000g离心20-30min，取上清液经0.22μm微孔滤膜过滤后上样经高效液相色谱进行检测。

更进一步的，所述步骤（a）中，所述混合水溶液中含有质量分数为0.25%的2-(4-硫代氯苯)三乙胺盐酸盐以及质量分数为3%的甘油，所述色素提取液中按质量比含有正己烷：丙酮：无水乙醇=2：1：1，并且含有质量分数为0.01%的2，6-二叔丁基-4-甲基苯酚；所述步骤（b）中，将待检测的水果在所述混合水溶液中浸泡2~5分钟后取出并在室温下避光存放9~11天，然后将果皮与果皮下0.5厘米的果肉分离。

上述待检验的水果优选桃、杏、或者苹果。