[发明专利]羊抗兔β防御素104a多克隆抗体及其制备方法和应用在审

专利信息
申请号: 201510744858.3 申请日: 2015-10-31
公开(公告)号: CN105237636A 公开(公告)日: 2016-01-13
发明(设计)人: 张春香;白元生;任有蛇;张国林;李迪;师周戈;赵宇琼;焦光月 申请(专利权)人: 山西农业大学
主分类号: C07K16/18 分类号: C07K16/18;C07K16/06;G01N33/68
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 030801 山西*** 国省代码: 山西;14
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摘要:
搜索关键词: 羊抗兔 防御 104 克隆 抗体 及其 制备 方法 应用
【权利要求书】:

1.羊抗兔β防御素104a多克隆抗体,其特征在于,它的核苷酸序列为TGTTTGAAAAGGTGGAATGTCAACTCACTGAATCCTCAGAAGGAC。

2.羊抗兔β防御素104a多克隆抗体制备方法,其特征在于,包括如下步骤:

S1、将β防御素104a蛋白N端55-69共15个氨基酸作为羊抗兔β防御素104a多克隆抗体的抗原表位,合成羊β防御素104a多肽;

S2、取步骤S1所得的1.5mgβ防御素104a多肽偶联到KLH,脱盐后作为免疫原备用;

S3、采用AbMax标准程序(42天),使用免疫原KLH-CLKRWNVNSLNPQKD多肽免疫兔子,采用步骤S2所得的免疫原进行若干次加强免疫,多肽-BSA的多抗效价达到标准:血清滴度≥1∶50000,第28天每只放血20ml并加强免疫,若动物无异常情况,则在第42天终放血,得羊抗兔β防御素104a多克隆抗体。

3.如权利要求2所述的羊抗兔β防御素104a多克隆抗体制备方法,其特征在于,所述抗原表位的氨基酸序列为CLKRWNVNSLNPQKD。

4.如权利要求1所述的羊抗兔β防御素104a多克隆抗体的应用,其特征在于,该抗体可以用于山羊和绵羊的免疫组织化学、免疫荧光化学和WesternBlotting检测。

5.如权利要求4所述的羊抗兔β防御素104a多克隆抗体的应用,其特征在于,用于免疫组织化学时浓度为1∶100-500;用于细胞免疫荧光化学时,浓度为1∶50-200;用于Westernblotting时,浓度为1∶500-1000。

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