[发明专利]一种交联羧甲基化琼脂糖基凝胶微球的制备方法

权利要求书

1.一种交联羧甲基化琼脂糖基凝胶微球的制备方法，步骤是：

(1)将琼脂糖和95％的乙醇按1g:3～8mL的比例加入反应器中，然后按琼脂糖和NaOH为1g:1.4～2.0g的比例加入NaOH，室温下搅拌12±1h，再按氯乙酸和NaOH为1g：1.4～2.0g的比例滴加氯乙酸溶液，并使氯乙酸与总反应液的体积为1g:3～12mL的比例，在温度20～45℃下反应2～4h；然后升温至60～65℃反应8±1h，完毕后，用滤纸过滤，收集的沉淀物用95％乙醇洗涤并在80±2℃下干燥24h以上，得到羧甲基化琼脂糖；其中，所述氯乙酸溶液是按氯乙酸与95％乙醇为1g:1～4mL的比例配制；

(2)按设定量称取羧甲基化琼脂糖，加入水中并加热溶解，配成浓度以g/mL计为3～6％的羧甲基化琼脂糖溶液，在90±2℃温度条件下保温备用；

(3)将含有Span 80的大豆油作为油相加入反应器，其中所述Span 80在大豆油的含量以体积百分比计为4～9％，在90±2℃下以800r·min^-1转速搅拌0.5～1h后将步骤(2)制得的羧甲基化琼脂糖溶液与油相按体积比为1:4～1:10的比例加入油相中，继续在800r·min^-1转速下搅拌45±5min，然后用冰水浴将反应液冷却至10～30℃，再在200r·min^-1转速下搅拌20±3min，完毕后，用250目的滤布过滤，收集的沉淀物，用95％乙醇洗涤去残余的油相，沉淀为羧甲基化琼脂糖基凝胶微球；按羧甲基化琼脂糖基凝胶微球与50％乙醇按体积比为1:10的比例将所述羧甲基化琼脂糖基凝胶微球置于50％乙醇中贮存，备用；

(4)取步骤(3)贮存的羧甲基化琼脂糖基凝胶微球用滤纸过滤去除液体，再按羧甲基化琼脂糖基凝胶微球与50％乙醇体积比为1:1～4的比例配成反应体系，并按NaOH与反应体系为1g:10～30mL的比例向该体系中加入NaOH，搅拌反应5～10h；然后按NaOH与环氧氯丙烷为1g:1.2～2.0mL的比例在20～45℃下向该体系中缓慢滴加环氧氯丙烷溶液，并使环氧氯丙烷的加入量以体积比计为总反应液体积的4-15％，其中所述环氧氯丙烷溶液是按环氧氯丙烷与95％乙醇为1mL:1～3mL的比例配制；滴加完毕后，在45℃温度条件下反应2～4h，然后升温至65±5℃反应6～10h，当反应液降至室温后，用250目的滤布过滤，收集微球并用蒸馏水洗净，用分样筛筛分出120～250目的微球样品，即获得交联羧甲基化琼脂糖基凝胶微球，将所述交联羧甲基化琼脂糖基凝胶微球置于20％乙醇中贮存。

2.根据权利要求1所述交联羧甲基化琼脂糖基凝胶微球的制备方法，其特征在于：步骤(1)所述氯乙酸和NaOH按1g：1.4～1.7g的比例滴加氯乙酸溶液，并使氯乙酸与总反应液的体积为1g:6～9mL的比例。

3.根据权利要求1所述交联羧甲基化琼脂糖基凝胶微球的制备方法，其特征在于：步骤(3)所述Span 80在大豆油的含量以体积百分比计为5～8％；所述羧甲基化琼脂糖溶液与油相的体积比为1:5～1:8，其中羧甲基化琼脂糖溶液浓度以g/mL计为4～6％。

4.根据权利要求1所述交联羧甲基化琼脂糖基凝胶微球的制备方法，其特征在于：步骤(4)所述NaOH与环氧氯丙烷按1g:1.2～2.0mL的比例在30～45℃下向反应体系中缓慢滴加环氧氯丙烷溶液，并使环氧氯丙烷的加入量以体积比计为总反应液体积的6～12％。