[发明专利]一种提高甘油酯型鱼油中EPA和DHA含量的方法有效
申请号: | 201510760395.X | 申请日: | 2015-11-10 |
公开(公告)号: | CN105349587B | 公开(公告)日: | 2019-05-31 |
发明(设计)人: | 汪钊;郑建永;王升帆;许新德;章银军;邵斌 | 申请(专利权)人: | 浙江工业大学;浙江医药股份有限公司新昌制药厂 |
主分类号: | C12P7/64 | 分类号: | C12P7/64;C12R1/69 |
代理公司: | 杭州天正专利事务所有限公司 33201 | 代理人: | 黄美娟;李世玉 |
地址: | 310014 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 提高 甘油酯 鱼油 epa dha 含量 方法 | ||
1.一种提高甘油酯型鱼油中EPA和DHA含量的方法,其特征在于所述方法为:以米曲霉(Aspergillus oryzae)WZ007经发酵培养获得的湿菌体用pH值为7.0的磷酸缓冲液悬浮后冷冻干燥制成的米曲霉WZ007冻干菌体为催化剂,以甘油酯型鱼油和乙酯型鱼油为底物,在30-80℃、200rpm条件下转化反应,反应结束后,将反应液过滤,滤饼回收重复利用,滤液分离纯化,获得提高EPA和DHA含量的甘油酯型鱼油;所述底物甘油酯型鱼油中EPA质量含量为9%-21%,DHA质量含量为9%-20%;所述底物乙酯型鱼油中EPA质量含量为30%-40%,DHA质量含量为20%-30%;所述甘油酯型鱼油用量以甘油酯物质的量计,所述乙酯型鱼油用量以乙酯物质的量计,所述甘油酯与乙酯物质的量之比为1:3,所述催化剂加入量以底物体积计为50~200g/L。
2.如权利要求1所述提高甘油酯型鱼油中EPA和DHA含量的方法,其特征在于所述米曲霉WZ007冻干菌体按如下方法制备:(1)斜面培养:将米曲霉WZ007接种至斜面培养基,30~37℃、转速150~200r/min条件下培养2~3天,作为斜面活化种子;斜面培养基质量终浓度组成:NaNO30.1~0.3%,K2HPO4 0.1~0.2%,KCl 0.3~0.7%,FeSO4 0.001~0.002%,MgSO4 0.04~0.06%,蔗糖2~5%,琼脂1.5~2.0%,溶剂为去离子水,pH自然;
(2)发酵培养:将斜面种子接种至液态发酵培养基,30~37℃、摇床转速150~200r/min条件下培养2~3天,过滤,得到菌丝体;液态发酵培养基终浓度组成为:葡萄糖20~60g/L,蛋白胨20~50g/L,蔗糖10~60g/L,尿素3~9g/L,NaCl 4~8g/L,K2HPO4 2~5g/L,MgSO4 1~3g/L,(NH4)2SO4 4~8g/L,溶剂为去离子水,pH自然;
(3)冻干菌体制备:将步骤(2)米曲霉WZ007经发酵培养过滤获得的湿菌体悬浮在pH值为7.0磷酸缓冲液中,-20~0℃冷冻干燥48h后,获得米曲霉WZ007冻干菌体。
3.如权利要求1所述提高甘油酯型鱼油中EPA和DHA含量的方法,其特征在于所述甘油酯型鱼油为鳀鱼鱼油、沙丁鱼鱼油或金枪鱼鱼油。
4.如权利要求1所述提高甘油酯型鱼油中EPA和DHA含量的方法,其特征在于所述底物甘油酯型鱼油中EPA和DHA质量总含量为18%-30%。
5.如权利要求1所述提高甘油酯型鱼油中EPA和DHA含量的方法,其特征在于所述乙酯型鱼油中EPA和DHA质量总含量为60-70%,其中EPA质量含量为35-40%,DHA质量含量为25-30%。
6.如权利要求1所述提高甘油酯型鱼油中EPA和DHA含量的方法,其特征在于所述混合液分离纯化的方法为:反应结束后,将滤液在50Pa、240℃条件下减压蒸馏至无液体流出,获得的浓缩物,即为提高EPA和DHA含量的甘油酯型鱼油。
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