[发明专利]一种电化学纳米免疫传感器及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种电化学纳米免疫传感器，其特征在于，所述传感器以海藻酸钠为桥联剂将纳米金和辣根过氧化物酶固定于电极表面，所述纳米金吸附有抗谷胱甘肽硫转移酶抗体；

所述传感器由如下方法制备得到：

(1)对电极进行预处理，然后在电极上包被由海藻酸钠溶液、纳米金溶胶和辣根过氧化物酶溶液组成的混合溶液；

(2)继续在电极上包被抗谷胱甘肽硫转移酶抗体；

(3)封闭液封闭后即得。

2.根据权利要求1所述的电化学纳米免疫传感器，其特征在于，所述抗谷胱甘肽硫转移酶抗体为单克隆抗体。

3.根据权利要求1所述的电化学纳米免疫传感器，其特征在于，所述电极为玻碳电极。

4.根据权利要求1所述的电化学纳米免疫传感器，其特征在于，所述海藻酸钠溶液以如下方法制得：将2g海藻酸钠溶于100mL双蒸水中，得到2％的海藻酸钠溶液，备用。

5.根据权利要求1所述的电化学纳米免疫传感器，其特征在于，所述纳米金溶胶以如下方法制得：取0.01g/100mL氯金酸溶液100mL，加入1g/100mL的柠檬酸钠溶液4mL混匀，置于微波炉中低火保持8-10min，待自然冷却后用超纯水补充至104mL，即得纳米金溶胶，置于4℃避光保存备用。

6.根据权利要求1所述的电化学纳米免疫传感器，其特征在于，所述辣根过氧化物酶溶液以如下方法制得：将辣根过氧化物酶溶于磷酸缓冲液中，即得辣根过氧化物酶溶液。

7.根据权利要求6所述的电化学纳米免疫传感器，其特征在于，将0.02g辣根过氧化物酶溶于10mL 0.01M pH值为7.4的磷酸缓冲液中，即得2.0g/L辣根过氧化物酶溶液。

8.根据权利要求1所述的电化学纳米免疫传感器，其特征在于，所述封闭液为牛血清白蛋白。

9.根据权利要求1所述的电化学纳米免疫传感器，其特征在于，其包括如下步骤：

(1)将玻碳电极预处理后，取由海藻酸钠溶液、纳米金溶胶和辣根过氧化物酶溶液组成的混合溶液滴涂于处理后的玻碳电极表面，置于4℃冰箱自然干燥24h后，浸于质量百分数为4％的CaCl₂溶液中5min固化成膜，超纯水清洗至洗出水在600nm下无吸光值，除去玻碳电极表面的CaCl₂溶液，得到SA/HRP/AU/GCE传感电极；

(2)将SA/HRP/AU/GCE传感电极置于纯化的抗谷胱甘肽硫转移酶单克隆抗体溶液中，4℃自组装至少24h，得到GST/SA/HRP/AU/GCE传感电极；

(3)最后将GST/SA/HRP/AU/GCE传感电极置于浓度为1g/100mL的牛血清白蛋白溶液中，37℃温育至少1h，以封闭非特异性位点，再以含体积百分比为0.05％Tween-20的磷酸缓冲液清洗未结合的牛血清白蛋白，自然晾干即得谷胱甘肽硫转移酶电化学纳米免疫传感器。

10.权利要求1～9任一项所述的电化学纳米免疫传感器的在谷胱甘肽硫转移酶检测中的应用。