[发明专利]一种电化学纳米免疫传感器及其制备方法和应用

说明书

本发明提供一种电化学纳米免疫传感器及其制备方法和应用。所述传感器以海藻酸钠为桥联剂将纳米金和辣根过氧化物酶固定于电极表面，所述纳米金吸附有抗谷胱甘肽硫转移酶抗体。所述制备方法包括步骤：(1)对电极进行预处理，然后在电极上包被由海藻酸钠溶液、纳米金溶胶和辣根过氧化物酶溶液组成的混合溶液；(2)继续在电极上包被抗谷胱甘肽硫转移酶抗体；(3)封闭液封闭后即得。本发明的电化学纳米免疫传感器不受样品的浊度、颜色的影响，无需对样品进行纯化、富集等预处理，操作简单，检测灵敏度高、特异性强，能够用于对谷胱甘肽硫转移酶进行快速定量检测，具有良好的应用前景。

技术领域

本发明涉及生物免疫检测技术领域，具体涉及一种电化学纳米免疫传感器及其制备方法和应用。

背景技术

GST标签是来自日本血吸虫中的谷胱甘肽硫转移酶蛋白，其结构非常保守。在基因工程中，蛋白质的表达经常用到各种融合蛋白表达系统，其中就包括GST标签表达体系，其具有蛋白表达产率高、表达产物纯化方便以及利于抗体制备等优点，目前已经得到越来越广泛的应用。用谷胱甘肽硫转移酶融合表达系统表达外源基因时，对融合表达产物的检测非常重要。目前常用的检测谷胱甘肽硫转移酶标签蛋白的方法是Western blot和ELIESA，但周期较长且灵敏度不高。因此，研究开发一种快速、灵敏、检测成本低的检测方法成为科学家们的强烈需要。

发明内容

本发明的目的是针对目前对谷胱甘肽硫转移酶检测不方便、耗时长、检测成本高等现有技术的缺陷，而提供一种电化学纳米免疫传感器及其制备方法和应用。本发明的电化学纳米免疫传感器不受样品的浊度、颜色的影响，无需对样品进行纯化、富集等预处理，操作简单，检测灵敏度高、稳定性好、特异性强，能够用于对谷胱甘肽硫转移酶进行快速定量检测。

本发明提供下述技术方案解决上述技术问题。

本发明提供的技术方案之一是：一种电化学纳米免疫传感器，所述传感器以海藻酸钠为桥联剂将纳米金和辣根过氧化物酶固定于电极表面，所述纳米金吸附有抗谷胱甘肽硫转移酶抗体。

所述抗谷胱甘肽硫转移酶抗体为本领域常规，其来源和类型均没有特殊要求，既可以是单克隆抗体，也可以是多克隆抗体，优选单克隆抗体。

所述电极可以是本领域常规所述的各类电极，优选玻碳电极。

本发明提供的技术方案之二是：前述电化学纳米免疫传感器的制备方法，其包括如下步骤：

(1)对电极进行预处理，然后在电极上包被由海藻酸钠溶液、纳米金溶胶和辣根过氧化物酶溶液组成的混合溶液；

(2)继续在电极上包被抗谷胱甘肽硫转移酶抗体；

(3)封闭液封闭后即得。

步骤(1)为对电极进行预处理，然后在电极上包被由海藻酸钠溶液、纳米金溶胶和辣根过氧化物酶溶液组成的混合溶液。

其中，所述电极可以是本领域常规所述的各类电极，优选玻碳电极(glassycarbon electrode，GCE)。

如本领域常规，所述包被为将电极置于溶液中进行包被或者将包被溶液滴涂于电极表面。优选地，所述包被为将电极置于由海藻酸钠溶液、纳米金溶胶和辣根过氧化物酶溶液组成的混合溶液中进行包被，或者将由海藻酸钠溶液、纳米金溶胶和辣根过氧化物酶溶液组成的混合溶液滴涂于电极表面。

所述海藻酸钠(Sodium alginate，SA)溶液优选以如下方法制得：将海藻酸钠溶于水得到海藻酸钠溶液，备用。更优选地，将2g海藻酸钠溶于100mL双蒸水中，得到2％的海藻酸钠溶液，备用。