[发明专利]一种祖师麻的有效成分测定方法

权利要求书

1.一种祖师麻制剂的有效成分测定方法，包括以下步骤：

1)对照品溶液的制备：取祖师麻甲素、7-羟基香豆素对照品，制成含祖师麻甲素、7-羟基香豆素的混合溶液；

2)供试品溶液的制备：取祖师麻片，研细，加入溶剂超声处理，滤过，得到续滤液；

3)测定法：取对照品溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，得到色谱图，根据色谱图计算供试品中相应成分的含量；

其中，色谱条件如下：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇为流动相A，以0.1％冰醋酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长327nm。理论板数按祖师麻甲素峰计算应不低于4000；

梯度洗脱表

2.根据权利要求1所述的有效成分测定方法，包括以下步骤：

1)对照品溶液的制备：取祖师麻甲素、7-羟基香豆素对照品适量，精密称定，加80-90％甲醇制成每0.5-2ml含祖师麻甲素0.08-0.12mg、7-羟基香豆素18-22μg的混合溶液，即得；

2)供试品溶液的制备：取祖师麻片18-22片，除去包衣，研细，取0.55-0.65g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入80-90％甲醇45-55ml，密塞，称定重量，超声处理25-35分钟，放冷，再称定重量，用80-90％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

3)测定法精密吸取对照品溶液与供试品溶液各8-12μl，注入液相色谱仪，得到色谱图，根据色谱图计算供试品中相应成分的含量。

3.根据权利要求1所述的有效成分测定方法，包括以下步骤：

1)对照品溶液的制备：取祖师麻甲素、7-羟基香豆素对照品适量，精密称定，加85％甲醇制成每1ml含祖师麻甲素0.1mg、7-羟基香豆素20μg的混合溶液，即得；

2)供试品溶液的制备：取本品20片，除去包衣，精密称定，研细，取约0.6g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入85％甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟，其功率500W，频率40kHz，放冷，再称定重量，用85％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

3)测定法精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，得到色谱图，根据色谱图计算供试品中相应成分的含量。

4.一种祖师麻制剂的鉴别方法，所述方法，包括以下步骤：

1)取祖师麻片剂2片，除去包衣，研细，置具塞锥形瓶中，加甲醇25ml，超声处理20分钟，滤过，滤液浓缩至约1ml，作为供试品溶液；

2)取祖师麻对照药材1g，研细，置具塞锥形瓶中，加甲醇25ml，超声处理20分钟，滤过，滤液浓缩至约1ml，制成对照药材溶液；

3)再取祖师麻甲素对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；

4)照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录ⅥB)试验，吸取上述三种溶液各2～5μl，对照提取物溶液5μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-丙酮-冰醋酸(7：1：0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光(254nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显一个相同颜色的主斑点；在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点。

5.一种祖师麻药材的指纹图谱建立方法，所述方法，包括以下步骤：

1)取祖师麻对照药材，加水煎煮，滤过，滤液浓缩，加甲醇使成为甲醇溶液，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

2)测定取取续滤液，注入液相色谱仪，得到色谱图。

其中，色谱条件如下：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇为流动相A，以0.1％冰醋酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长327nm。理论板数按祖师麻甲素峰计算应不低于4000，

梯度洗脱表

6.根据权利要求5所述的指纹图谱建立方法，所述方法，包括以下步骤：

1)取祖师麻对照药材1.8-2.2g，加水煎煮0.5-2小时，滤过，滤液浓缩至约8-12ml，加甲醇使成为65-75％的甲醇溶液，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

2)测定法吸取续滤液8-12μl，注入液相色谱仪，得到色谱图。