[发明专利]活化部分凝血活酶时间测定试剂盒及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种体外诊断试剂盒及其制备方法，尤其涉及一种活化部分凝血活酶时间测定试剂盒及其制备方法，属于生物技术领域。

背景技术

机体的止血功能是由血小板、凝血系统、纤溶系统和血管内皮系统等的共同作用来完成的。过去我们曾用出血时间作为止血功能缺陷的筛检试验，但因其操作标准化程度不高，敏感性不好，且无法反映凝血因子的含量及活性，故目前已为凝血功能检查所取代。凝血功能检查主要是凝血四项——凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、凝血酶时间和纤维蛋白原含量。凝血四项是检验科的重要临检项目，也是手术前必须检测的项目之一，凝血四项检测对了解检查对象的凝血功能有重要意义。

活化部分凝血活酶时间(APTT)测定是内源性凝血因子缺乏最可靠的筛选试验，是用来证实先天性或获得性凝血因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ的缺陷或是否存在它们相应的抑制物。APTT延长见于：(1)因子Ⅷ、Ⅸ和Ⅺ血浆水平减低，如血友病。(2)严重的凝血酶原(因子Ⅱ)因子Ⅴ、Ⅹ和纤维蛋白原缺乏，如肝脏疾病、阻塞性黄疸、新生儿出血症、肠道灭菌综合征、吸收不良综合征、口服抗凝剂、应用肝素以及低(无)纤维蛋白原血症。(3)纤容活力增强，如继发性或原发性纤溶以及血循环中有纤维蛋白(原)降解物(FDP)。(4)血循环中有抗凝物质，如抗因子Ⅷ或Ⅸ抗体、SLE等。APTT缩短见于：(1)高凝状态，如DIC的高凝血期，促凝物质进入血流以及凝血因子的活性增高等。(2)血栓性疾病，如心肌梗塞、不稳定性心绞痛、脑血管病变、糖尿病伴血管病变、肺梗死、深静脉血栓形成、妊娠高血压综合征和肾病综合征等。

由于市售的活化部分凝血活酶时间(APTT)测定试剂盒种类繁多且质量参差不齐，使得同个患者在不同的实验室中测定的结果差别较大，使得检测结果不准确，从而影响医生对疾病的正确诊断与治疗。因此，活化部分凝血活酶时间(APTT)测定试剂的质量成了准确的测定结果及正确诊断治疗的关键性因素。同时，由于很多干粉试剂需复溶后使用，而复溶后的试剂稳定性又较差，又会给APTT测定的操作带来麻烦并且造成不必要的浪费，因此，研制一种有效可靠、使用方便的活化部分凝血活酶时间(APTT)测定试剂无疑是相当必要的。

发明内容

为了克服上述现有背景技术中的不足，本发明提供一种活化部分凝血活酶时间测定试剂盒及其制备方法，该活化部分凝血活酶时间测定试剂盒免去了配制过程中的分装和冻干等步骤，避免了使用过程中复溶所导致试剂稳定性和测定效果变差的问题，保证了试剂的稳定性，同时也避免了试剂的浪费，进一步得到准确性、重复性及稳定性等总体性能更好且操作更简便的活化部分凝血活酶时间测定试剂。

为了实现上述目的，本发明提供一种活化部分凝血活酶时间测定试剂盒，包含磷脂试剂和氯化钙试剂，两种试剂储存在不同容器中；

所述磷脂试剂由固体激活剂、磷脂和缓冲体系混合而成，所述固体激活剂的含量为0.01～2g/L，所述固体激活剂选自鞣花酸、皂土、高岭土、硅藻土、硅酸镁铝其中一种或几种的混合物；所述磷脂的含量为2.5～8wt％，所述缓冲体系的pH为6.0～8.0，所述缓冲体系中各组分含量为包括：0.1～1M的缓冲剂、0.01～0.2wt％的稳定剂、0.1～1.0wt％的聚乙二醇、其余为水；所述缓冲剂选自于：Tris-Hcl、Hepes、PBS、MPOS；所述稳定剂选自于：叠氮钠、Kathon、Proclin、甘氨酸、牛血清白蛋白、硫柳汞、硝酸汞苯、氯仿、石炭酸；

所述氯化钙试剂的工作浓度为15～40mM。

优选地，在上述技术方案中，所述固体激活剂的含量为0.05～1g/L。

优选地，在上述技术方案中，所述磷脂含量为5～7wt％。

优选地，在上述技术方案中，所述磷脂为兔脑磷脂。

优选地，在上述技术方案中，所述缓冲剂在缓冲体系中的含量为0.4～0.75M。

优选地，在上述技术方案中，所述稳定剂在缓冲体系中的含量为0.05～0.1wt％，更优选地，所述稳定剂为Kathon、甘氨酸、血清白蛋白的1:0.86:1.1的混合物。

优选地，在上述技术方案中，所述稳定剂选自于：叠氮钠、Kathon、Proclin、甘氨酸、牛血清白蛋白、硫柳汞、硝酸汞苯、氯仿、石炭酸。

优选地，在上述技术方案中，所述聚乙二醇在缓冲体系中的含量为0.3～0.8wt％。

优选地，在上述技术方案中，所述氯化钙试剂的工作浓度为20～35mM。