[发明专利]一种非变性海蜇胶原蛋白的制备方法有效
申请号: | 201510769412.6 | 申请日: | 2015-11-12 |
公开(公告)号: | CN105255981B | 公开(公告)日: | 2019-04-02 |
发明(设计)人: | 林娟;郑明星;黄新华;朱凡;叶秀云 | 申请(专利权)人: | 福州大学 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K14/78;C07K1/34 |
代理公司: | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人: | 蔡学俊 |
地址: | 350108 福建省福州市*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 变性 海蜇 胶原 蛋白 制备 方法 | ||
1.一种非变性海蜇胶原蛋白的制备方法,其特征在于:所述方法包括如下:
(1)将腌制的海蜇加工下脚料用清水冲洗几遍,再用蒸馏水浸泡,并每隔2 h更换一次蒸馏水,清洗1~2 d,取出后搅拌机搅碎至无明显大颗粒,再用四层纱布过滤沥干;
(2)向搅拌获得的海蜇中加入5~20倍体积的丙酮浸泡1~2 d,蒸馏水清洗至无味,再加入5~20倍体积的0.01~0.1 mol/L的磷酸氢二钠溶液浸泡2~3 d,蒸馏水清洗至中性,滤干;
(3)称取海蜇皮匀浆于含有1.5~2.0 wt.%胃蛋白酶的0.05~0.07 mol/L柠檬酸溶液中,使料液比达到1:1.0~1:3.0,15~20℃提取8~12 h;
(4)离心取上清液加入NaCl溶液,搅拌过夜;离心取沉淀重新溶于柠檬酸溶液中,转入30~50 kDa的透析袋,置于蒸馏水透析2~3 d;冷冻干燥后即得胶原蛋白棉状固体;
步骤(3)中柠檬酸浓度0.05 mol/L、胃蛋白酶添加量1.5 wt.%、料液比(m/V)1:2.0,在15℃下提取时间8 h。
2.根据权利要求1所述的一种非变性海蜇胶原蛋白的制备方法,其特征在于:步骤(2)具体步骤为:添加丙酮至料液比1:5~1:20,静置过夜,大量蒸馏水清洗至无异味,再用四层纱布过滤沥干;置于5~20倍体积的0.01~0.1 mol/L的磷酸氢二钠溶液中浸泡2~3 d,每隔6h更换一次溶液,大量蒸馏水清洗至中性,再用四层纱布过滤沥干,于4℃存放备用。
3.根据权利要求1所述的一种非变性海蜇胶原蛋白的制备方法,其特征在于:步骤(4)中上清液的NaCl终浓度为1.0 mol/L,重溶的柠檬酸溶液浓度为1 mmol/L。
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