[发明专利]一种非变性海蜇胶原蛋白的制备方法

说明书

本发明提供了一种非变性海蜇胶原蛋白的制备方法，属于生物技术领域，以腌制海蜇加工下脚料为原料，建立在中低温条件下采用柠檬酸为提取剂的非变性胶原蛋白提取工艺，得到较高纯度的胶原蛋白产品，有效提高海蜇产品附加值，实现低值海蜇高值化利用，为胶原蛋白的制备提供新来源。

技术领域

本发明公开的是一种以腌制海蜇加工下脚料为原料制备非变性胶原蛋白的方法，涉及食品生物技术领域。本发明工艺简单、成本低廉，制备的胶原蛋白提取率高、结构完整，适于工业生产，可用于医药、生物材料和美容等领域。

技术背景

胶原蛋白是生物体内含量最丰富的结构蛋白，广泛分布在哺乳动物皮肤、骨、血管和肌腱等结缔组织中，起着支撑、修复和保护的作用。胶原蛋白含有独特的由三条α-肽链组成的三螺旋结构，一般分子量都比较大，难溶于水和稀碱，某种程度上部分可溶于稀酸或中性盐，其独特的三螺旋结构，赋予其可成膜性、低免疫原性等优良特性，在食品、医药、美容、生物材料等领域具有重要地位。

由于哺乳动物体内存在大量的胶原蛋白，长期以来，工业上胶原蛋白的提取原料大部分都是来源于猪皮、牛皮等陆生哺乳动物的毛皮，但是近些年，由于口蹄疫、禽流感等家畜传染病的影响，人们对于家畜来源制品的安全性的不信任感增强，再者某些地区的宗教习俗等原因，对家畜制品也会有排斥心理，因此，寻找这些家畜毛皮以外的胶原蛋白来源成为新的研究热点。海洋来源的胶原蛋白拥有其他来源的胶原蛋白所不可比拟的优点，如含有更多的蛋氨酸(Met)含量、更低的热变性温度等，越来越受到消费者的喜爱。

海蜇是一种暖水性大型食用水母，色鲜味美，兼具多种药用功效，是当前进行人工养殖的最低等海洋动物之一，具有重要的渔业经济价值。21世纪初期，海蜇产品的市场需求量日益增加，人工海蜇养殖的技术取得重大突破，海蜇养殖产业快速发展，海蜇的高值化利用也日益受到人们的关注。研究表明，海蜇皮的干基组分中84.33%是蛋白质，而在这些蛋白质中，大部分都是胶原蛋白。因此，海蜇可以作为一个新型的胶原蛋白制备来源，相信在医药、生物材料和美容领域中都会具有不错的发展前景。

目前，胶原蛋白的提取方法可以归类为三种：利用高压辅助提取的物理方法；在低温或者热水条件下利用溶剂辅助提取的方法，根据溶剂的类型可分为酸法、碱法和盐法；利用蛋白酶在一定的温度和pH下进行酶解提取的酶法。一般来说，高压、高温条件提取的胶原蛋白都已经变性成明胶，只有在低温环境下提取的胶原才有可能保持胶原蛋白本身的三螺旋结构。

在现有的胶原蛋白制备技术中，酸提取法和酶法是最为广泛使用的，但是在这些技术中还存在着两个方面的问题：一方面，胶原蛋白得率不高，酸提取法的胶原得率一般不超过5%，某些原料甚至不含酸溶性胶原，酶法的胶原得率也在80%以下；另一方面，酶法采用的反应温度均在10℃以下，成本昂贵，提取时间也在1 d以上，不利于工业推广。

发明内容

本发明提供了一种非变性海蜇胶原蛋白的制备方法，以腌制海蜇加工下脚料为原料，建立在中低温条件下采用柠檬酸为提取剂的非变性胶原蛋白提取工艺，得到较高纯度的胶原蛋白产品，有效提高海蜇产品附加值，实现低值海蜇高值化利用，为胶原蛋白的制备提供新来源。

本发明提供的非变性海蜇胶原蛋白的制备方法，所述方法包括如下：

（1）将腌制的海蜇加工下脚料用清水冲洗几遍，再用蒸馏水浸泡，并每隔2 h更换一次蒸馏水，清洗1~2 d，取出后搅拌机搅碎至无明显大颗粒，再用四层纱布过滤沥干；

（2）向搅拌获得的海蜇中加入5~20倍体积的丙酮浸泡1~2 d，蒸馏水清洗至无味，再加入5~20倍体积的0.01~0.1 mol/L的磷酸氢二钠溶液浸泡2~3 d，蒸馏水清洗至中性，滤干；

（3）称取海蜇皮匀浆于添加含有1.5~2.0 wt.%胃蛋白酶的0.05~0.07 mol/L柠檬酸溶液中，使料液比达到1:1.0~1:3.0，15~20℃提取8~12 h；