[发明专利]二对甲苯磺酸缘生替尼原料药中有关物质的检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及分析化学技术领域，尤其涉及二对甲苯磺酸缘生替尼原料药中有关物质检测方法。

背景技术

(N-(3-氯代-4-(3-氟代苄氧基)苯基)-6-(3-(4-甲基-4-氧基-1-氮-4-磷杂环己烷-1-基)丙-1-炔基)喹唑啉-4-胺，双4-甲基苯磺酸盐)，又名二对甲苯磺酸缘生替尼，是近年来研发出的I型受体蛋白激酶抑制剂的包含磷取代的新喹唑啉衍生物。可用于治疗哺乳动物中与蛋白激酶活性异常相关的疾病，如癌症或炎症。

二对甲苯磺酸缘生替尼作为一种新研发出的药物，为了保证其质量及用药的安全性，在生产和使用的过程中，都需要对原料药中的有效成分含量、有关物质种类及含量、残留溶剂、微生物情况进行检测和分析。

有关物质主要是在生产过程中带入的起始原料、中间体、聚合体、副反应产物，以及贮藏过程中的降解产物等。有关物质研究是药品质量研究中关键性的项目之一，其含量是反映药品纯度的直接指标。对药品的纯度要求，应基于安全性和生产实际情况两方面的考虑。

二对甲苯磺酸缘生替尼原料药中主要的有关物质如表1所示：

表1 二对甲苯磺酸缘生替尼原料药中主要的有关物质

目前尚未有关于二对甲苯磺酸缘生替尼中有关物质检测方法的报道。因此，应当开发检出限、定量限低；灵敏度、专属性强；精密度、准确度高的二对甲苯磺酸缘生替尼原料药中有关物质的测定方法。

发明内容

有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供检出限、定量限低；灵敏度、专属性强；精密度、准确度高的二对甲苯磺酸缘生替尼原料药中有关物质的测定方法。

本发明提供的二对甲苯磺酸缘生替尼原料药中有关物质的检测方法，将二对甲苯磺酸缘生替尼原料药溶解，以甲醇为流动相A，以乙酸铵的水溶液为流动相B，以高效液相色谱检测获得色谱图，根据色谱图获得二对甲苯磺酸缘生替尼原料药中有关物质的含量。

本发明提供的二对甲苯磺酸缘生替尼原料药中有关物质的检测方法是通过高效液相色谱法进行的。利用高效液相色谱(HPLC)对物质进行定量检测是目前常用的检测方法，在面对需要对二对甲苯磺酸缘生替尼原料药中有关物质的含量进行定量分析时，采用高效液相色谱是一种快速有效的方式。但是，现有技术中，并没有报道如何采用HPLC对二对甲苯磺酸缘生替尼中的有关物质进行定量检测，而当采用HPLC对一种新的物质进行检测时需要对该方法进行系统适用性、专属性、精密度、耐用性等多方面的鉴定，具体标准为：

系统适用性：杂质与主峰或者已知杂质与杂质之间的分离度不小于1.5，未知杂质与未知杂质之间的分离度不小于1.2

专属性：在酸、碱、氧化、高温、光照降解试验的图谱中，主峰的纯度因子应大于阈值。

线性及范围：回归系数r:≥0.99，线性范围：至少在杂质质量标准限度的50％～150％内。

重复性：配制6个供试品溶液，每个溶液进2针，用对照品溶液计算主成份含量，要求6个结果的RSD小于限度的50％。

中间精密度：由不同分析员，使用不同的仪器，在不同日期对同一批样品进行检测。要求6份样品的测定结果RSD小于限度的50％。

准确度：加标回收率80.0％～120.0％。

耐用性：主要考虑溶液稳定性：供试品溶液在24h内稳定，并且要求检测条件的微小变化对主峰含量的测定影响不大，分离度、理论塔板数均符合要求。

为了提高检测效果，本发明提供的方法在进行高效液相色谱检测时采用梯度洗脱。梯度洗脱是在一个分析周期内程序控制流动相的组成，如溶剂的极性、离子强度和pH值等，用于分析组分数目多、性质差异较大的复杂样品。采用梯度洗脱可以缩短分析时间，提高分离度，改善峰形，提高检测灵敏度，但是常常引起基线漂移和降低重现性。

在本发明的实施例中，高效液相色谱的洗脱程序为：0～20min，甲醇体积分数由30％±2％至73％±2％；20min～30min，甲醇体积分数为73％±2％；30min～40min，甲醇体积分数由73％±2％至80％±2％；40min～50min，甲醇体积分数为80％±2％。

在一些实施例中，高效液相色谱的洗脱程序为：0～20min，甲醇体积分数由30％至73％；20min～30min，甲醇体积分数为73％；30min～40min，甲醇体积分数由73％至80％；40min～50min，甲醇体积分数为80％。