[发明专利]一种酶法不对称还原制备(S)-N-boc-3-羟基哌啶的方法

权利要求书

1.一种酶法不对称还原制备(S)-N-boc-3-羟基哌啶的方法，其特征在于：以氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示的醇脱氢酶为催化剂，以N-boc-3-哌啶酮为底物，NADH为辅酶体系，不对称还原制备(S)-N-boc-3-羟基哌啶；所述NADH辅酶体系为醇脱氢酶、NAD+和异丙醇组成的底物偶联的辅酶循环混合体系；所述NADH辅酶体系中NAD⁺的浓度为0.05~0.5 mmol/L，异丙醇13.5~198 g/L。

2.根据权利要求1所述的酶法不对称还原制备(S)-N-boc-3-羟基哌啶的方法，其特征在于：N-boc-3-哌啶酮的浓度为15~220 g/L，醇脱氢酶活性为5.6 U/mg蛋白，用量为60U~6000U。

3.根据权利要求1所述的酶法不对称还原制备(S)-N-boc-3-羟基哌啶的方法，其特征在于：反应条件为pH6.0~7.5、20~35℃、180~280rpm条件下反应1~12h。

4.根据权利要求1所述的酶法不对称还原制备(S)-N-boc-3-羟基哌啶的方法，其特征在于：所述NADH辅酶体系为NAD⁺、甲酸钠和甲酸脱氢酶混合体系。

5.根据权利要求1所述的酶法不对称还原制备(S)-N-boc-3-羟基哌啶的方法，其特征在于：所述NADH辅酶体系为NAD⁺、葡萄糖和葡萄糖脱氢酶混合体系。

6.根据权利要求1所述的酶法不对称还原制备(S)-N-boc-3-羟基哌啶的方法，其特征在于：所述的醇脱氢酶是通过表达含有基因序列如SEQ ID NO：1所示的重组菌得到的。

7.根据权利要求3所述的酶法不对称还原制备(S)-N-boc-3-羟基哌啶的方法，其特征在于：反应条件为pH7.0、30℃、200rpm条件下反应6h。