[发明专利]一种丹红注射液的指纹图谱测定方法

权利要求书

1.一种丹红注射液的指纹图谱测定方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）对照品溶液的制备：分别称取异绿原酸C、迷迭香酸、紫丁香苷、腺苷、5-羟甲基糠醛、香豆酸、山柰酚-3-O-芸香糖苷、西红花苷I、原儿茶酸、原儿茶醛、丹参素钠、咖啡酸对照品，分别加乙腈溶解，分别制成0.1mg/ml的对照品溶液；

（2）内标溶液的制备：称取异绿原酸C，加入乙腈制成浓度为1mg/mL的内标溶液；

（3）供试品溶液制备：量取丹红注射液，加入0.4%甲酸水溶液稀释，摇匀得稀释液，取稀释液加入浓度为1mg/ml的内标溶液，混匀，即得；

（4）利用高效液相色谱-质谱法进行分析测定。

2.根据权利要求1所述的指纹图谱测定方法，其特征在于，所述供试品溶液的制备方法为：量取丹红注射液5ml，置10ml量瓶中，加入5ml0.4%甲酸水溶液稀释至刻度，摇匀得稀释液，取750μl稀释液加入50μl浓度为1mg/mL的异绿原酸C内标溶液，混匀，即得。

3.根据权利要求1或2所述的指纹图谱测定方法，其特征在于，所述高效液相色谱分离使用AgelaVenusilMPC18色谱柱：250mm×4.6mm，3μL，在柱温30℃，流速1.0mL/min；检测波长280nm；进样量10μL条件下，以乙腈为流动相A，体积分数为0.2%甲酸水溶液为流动相B，体积分数为0.5%的甲酸水溶液为流动相C进行梯度洗脱。

4.根据权利要求3所述的指纹图谱测定方法，其特征在于，所述梯度洗脱的条件为：0～4min，0～0.3%流动相A，100～99.7%流动相B；4～6min，0.3～1.2%流动相A，99.7～98.8%流动相B；6～15min，1.2～3%流动相A，98.8～97%流动相B；15～30min，3～3%流动相A，97～97%流动相B；30～40min，3～5%流动相A，97～95流动相B；40～60min，5～5%流动相A，95～95%流动相B；60～70min，5～8%流动相A，95～92%流动相B；70～100min，8～8%流动相A，92～92%流动相B；100～125min，8～14%流动相A，92～86%流动相B；125～165min，14～15.6%流动相A，86～0%流动相B，0～84.4%流动相C；165～260min，15.6～15.6%流动相A，84.4～84.4%流动相C；260～272min，15.6～16.7%流动相A，84.4～83.3%流动相C；272～320min，16.7～16.7%流动相A，83.3～83.3%流动相C；320～380min，16.7～25%流动相A，83.3～75%流动相C；380～400min，25～25%流动相A，75～75%流动相C；

所述百分比均为体积百分比。

5.根据权利要求1所述的指纹图谱测定方法，其特征在于，所述质谱法的条件为：电喷雾离子源为正负离子交替扫描模式；扫描级数5级；扫描范围：50～1000m/z；扫描速度26000m/z·s^-1；喷雾气压力35psi；干燥气温度350℃；干燥气流速9L·min^-1；毛细管电压4000V。