[发明专利]一种磷脂酸的制备方法

说明书

本发明公开了一种磷脂酸的制备方法，包括以下步骤：取粗卵磷脂溶于有机溶剂中制成粗卵磷脂溶液，取磷脂酶D制成磷脂酶D水溶液，将粗卵磷脂溶液与磷脂酶D水溶液混合进行酶催化反应，反应完毕分离出有机相，将有机相浓缩干，得浓缩物，将浓缩物采用萃取剂萃取并低温沉淀，保温后取萃取剂不溶物浓缩干后过层析柱，采用洗脱溶剂洗脱后将洗脱液干燥，即获得较高纯度的磷脂酸。本发明所用的原料为大豆粗卵磷脂或葵花籽粗卵磷脂，因磷脂酰胆碱含量较低而价格低廉；该方法整体工艺简洁，能耗和成本较低，易于实现规模化工业化，制得的磷脂酸含量60%以上，纯度较高，对我国磷脂工业，保健食品以及药品工业都将具有重要意义。

技术领域

本发明属于磷脂技术领域，具体涉及一种磷脂酸的制备方法。

背景技术

磷脂酸( PA )是一种简单的磷脂，是动植物细胞膜、核膜、质体膜的基本成分，是生命的基础物质。脂酸是一种酸性磷脂，是由甘油基、脂肪酸基团、磷酸基组成。脂肪酸基团常为棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸、亚麻酸、花生四烯酸等。从化学结构上看，PA 为两性化合物，脂肪酸基团的一端具有强的亲油性，而磷酸基团的一端具有强的亲水性。磷脂酸在生物体内含量虽然很少，但却是甘油酯和大多数磷脂的合成的中间体，同时磷脂酸是细胞内重要的第二信使。磷脂酸广泛应用于在食品、药品、化妆品中。

现有关于磷脂酸的制备方法比较多，有薄层色谱分离、溶剂提取、酶转化以及化学合成等方法。薄层色谱分离、溶剂提取、酶转化法等均以天然磷脂为原料，天然磷脂主要从大豆、花生、葵花子、油菜籽、红化籽、芥籽、芝麻仁、橄榄仁、玉米、棉籽等提取，或是从蛋黄提取。上述现有的方法普遍存在制备量少，工艺繁琐，成本高等缺点。

发明内容

本发明的目的在于提供一种磷脂酸的制备方法，该制备方法工艺简洁、能耗和成本较低，易于实现工业化生产，且可大量制备磷脂酸。

本发明的上述目的是通过采取如下技术手段来实现的：一种磷脂酸的制备方法，包括以下步骤：取粗卵磷脂溶于有机溶剂中制成粗卵磷脂溶液，取磷脂酶D制成磷脂酶D水溶液，将粗卵磷脂溶液与磷脂酶D水溶液混合进行酶催化反应，反应完毕分离出有机相，将有机相浓缩干，得浓缩物，将浓缩物采用萃取剂萃取并低温沉淀，保温后取萃取剂不溶物浓缩干后过层析柱，采用洗脱溶剂洗脱后将洗脱液干燥，即获得较高纯度的磷脂酸。

在上述磷脂酸的制备方法中：

本发明所述的粗卵磷脂的来源优选为大豆粗卵磷脂或葵花籽粗卵磷脂，所述的粗卵磷脂中磷脂酰胆碱含量不低于10%。

本发明所述的有机溶剂优选为乙酸乙酯、乙酸丁酯或正己烷；所述的粗卵磷脂溶液的浓度优选为100~200g/L。

本发明所述的磷脂酶D水溶液中磷脂酶D的酶活优选为4~5U/mL，其pH优选为5.6~6.5。

本发明所述的粗卵磷脂溶液与所述的磷脂酶D水溶液的体积比优选为1~4:1。

本发明酶催化反应的温度优选为30~37℃，时间优选为30~40小时。

本发明所述的萃取剂优选为甲醇，其体积百分含量优选为90~95%，甲醇的用量优选为粗卵磷脂总质量的5~10倍，体积质量比。

本发明萃取时的温度优选为40~50℃，萃取时间优选为3~5小时；低温沉淀时的温度优选为-10~5℃，保温时间优选为8~16小时。

本发明所述的层析柱为硅胶层析柱，硅胶与萃取剂不溶物的质量份配比优选为10~20:1，所述硅胶的目数优选为200~300目。

本发明所述的洗脱溶剂优选为正己烷、环己烷或二氯甲烷。

与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：

（1）本发明所用的原料为大豆粗卵磷脂或葵花籽粗卵磷脂，因磷脂酰胆碱含量较低而价格低廉；