[发明专利]一种新的甜味绞股蓝甜味素制备及其应用

权利要求书

1.一种从甜味绞股蓝中提取的甜味素，分子式为C₁₄H₂₄O₁₂，分子量384，分子结构为葡萄糖6-醛酸乙酯-1,4-α-D半乳糖，所述新型甜味素的制备包括以下技术步骤：

(1)选用甜味绞股蓝茶叶，在索氏提取器中用有机溶剂脱去脂溶性杂质叶绿素、脂肪和皂苷，取残渣于通风处除去溶剂；

(2)在步骤1处理过的绞股蓝中加入1 ~ 7倍质量的蒸馏水，保温70℃ ~ 100℃搅拌提取0.5h ~ 2h，重复提取2次，离心过滤取上清液合并，用旋转蒸馏器真空浓缩；

(3)在步骤2浓缩液中加入氨水调节溶液pH值为8 ~ 9, 再分次加入30%的H₂O₂脱色1~3天；

(4)用Sevage法脱蛋白，即加入体积比为 5/1的氯仿/正丁醇混合溶剂, 用搅拌器搅拌混合物30 min, 离心分离后取上层水溶液, 分去水层与溶剂层交界处的变性蛋白质及下层氯仿溶液，重复脱蛋白多次, 至紫外检测器在蛋白质的特征吸收峰280 nm未检出游离蛋白质，取水溶液再用旋转蒸馏器真空浓缩；

(5)脱色、除蛋白后浓缩液用截留分子量范围为500 ~ 2000的透析袋在蒸馏水中透析2~ 4天，每天至少换水一次，除去大分子多糖杂质和蛋白质，取透析袋外透析液，用旋转蒸馏器真空浓缩；

(6)将步骤5中的溶液用截留分子量范围为100 ~ 500的透析袋在蒸馏水中透析，除去少量盐及有机溶剂，取透析袋内溶液，用旋转蒸馏器真空浓缩；

(7)将步骤6中的溶液用冷冻干燥机干燥，得甜味素样品。

2.根据权利要求1，其特征在于：所用脱去叶绿素、脂肪和皂苷的有机溶剂为丙酮、乙酸乙酯或石油醚中的一种或几种。

3.根据权利要求1，其特征在于：旋转蒸馏器真空浓缩时温度低于70℃，真空度为0.005~0.05MPa。

4.根据权利要求1，其特征在于：H₂O₂脱色在常温常压下进行，H₂O₂与提取液体积比为1：100~1：50，加入H₂O₂前需加入氨水调节溶液pH值为8 ~ 9。

5.根据权利要求1，其特征在于：用Sevage法脱蛋白时，Sevage试剂与提取液体积比为1：20~1：5。

6.根据权利要求1，其特征在于：冷冻干燥机干燥时温度为-20℃以下，真空度为0.001~0.005MPa。

7.根据权利要求1，其特征在于：制备所述甜味素的另一种方法是，省略步骤1、步骤3和步骤4，用甜味绞股蓝茶叶直接由步骤2加入水提取，由步骤5除蛋白，步骤6除去少量盐及有机溶剂，步骤7干燥，得甜味素样品。

8.根据权利要求1所得绞股蓝甜味素的应用，其特征在于：用于风味饮料、食品添加剂。