[发明专利]一种新的甜味绞股蓝甜味素制备及其应用

说明书

一种从甜味绞股蓝中提取的甜味剂，其主要结构为葡萄糖6‑醛酸乙酯‑1,4‑α‑D半乳糖。制备方法是选用甜味绞股蓝茶，通过有机溶剂脱去叶绿素、脂肪和皂苷，用蒸馏水保温70~100℃提取0.5h~2h，提取液经过用H₂O₂脱色，用Sevage法脱蛋白，用截留分子量范围为500~2000的透析袋在蒸馏水中透析，除去大分子多糖和蛋白质杂质，用截留分子量为100~500的透析袋在蒸馏水中透析，除去少量盐及有机溶剂。另一种制备方法是直接用水提取，用不同截留分子量的透析袋透析除去杂质。最后用冷冻干燥机干燥得甜味素样品。所得绞股蓝甜味素纯度高，其甜度是蔗糖的300~1200倍。

技术领域

本发明属于天然产物提取技术领域，具体涉及从甜味绞股蓝中提取、分离、纯化甜味素制备方法结构表征及其应用。

背景技术

绞股蓝又称天堂草、福音草、超人参、公罗锅底、遍地生根、七叶胆、五叶参和七叶参等，拉丁文名：Gynostemma pentaphyllum (Thunb.) Makino 葫芦科、绞股蓝属草质攀援植物，茎细弱，具分枝，具纵棱及槽，无毛或疏被短柔毛。日本称之甘蔓茶。绞股蓝喜阴湿温和的气候，多野生在林下、小溪边等荫蔽处，多年生攀援草本。在中国主要分布在陕西平利、甘肃康县、湖南、湖北，云南、广西等省，号称“南方人参”，生长在南方的绞股蓝药用含量比较高，民间称其为神奇的“不老长寿药草”，具有降血脂，调血压防治血栓，防治心血管疾患，调节血糖，促睡眠，缓衰老，防抗癌，提高免疫力，调节人体生理机能等作用功效。1986年，国家科委在“星火计划”中，把绞股蓝列为待开发的“名贵中药材”之首位，2002年3月5日国家卫生部将其列入保健品名单。绞股蓝新品种“恩五叶蜜”、“恩七叶甜”，2008年获得湖北省科技进步二等奖，含有其它品种绞股蓝和其它植物没有的新型的天然非糖甜味物质。

目前绞股蓝主要作为茶饮料，由于其中含有皂苷、甜味素、蛋白和多糖等多种成分，各种成分的作用亦不同，作为保健品长期饮用，对部分人可能会产生恶心呕吐、腹胀腹泻（或便秘）、头晕、眼花、耳鸣等一些副作用。因而提取其中有效成分对于研究其疗效和保健作用显得十分重要。

非专利文献《绞股蓝甜味物质分离鉴定》（刘金龙 ,孙东发等，食品科学,2007, 28（10）：480-483）报道，采用超声波、ZTC1+1除杂剂、G-10凝胶层析等提取分离技术，得到甜味物质，其分子量 251，分子式估计为C13H19N2O3，与蔗糖、葡萄糖以及目前开发的罗汉果甜素、甘草甜素、多穗柯甜素、甜叶菊甜素分子结构不同。《“恩七叶甜”绞股蓝甜味物质分子结构初步研究》（郑小江，刘金龙，毛先发.食品科学，2009, 30（21）：46-49)，其甜味物质分子纯化方法为“恩七叶甜”干叶粉末乙醚脱脂→ 95% 乙醇浸泡超声波破碎→热浸提→离心过滤→ZTC除杂→离心→浓缩→甲醇溶解丙酮沉淀→沉淀物用去离子水溶解水饱和正丁醇萃取→水相浓缩→过硅胶柱→过Sephadex G-10 纯化冷冻干燥。主要有2个组分，一个分子量为274，无法确定结构；另一个分子量为170，分子式可能为C11H10N2。但这两种方法均为实验室少量提取，且分子纯度不高，结构并未完全弄清。

相关的绞股蓝甜味素专利文献目前没有。

发明内容

本发明针对目前绞股蓝甜味素结构未完全弄清问题，提供一种逐步分离、提取纯化方法，同时应用多种表征技术对其纯度和结构进行跟踪表征，最终得到纯度高，结构准确的绞股蓝甜味素。

本发明另一目的是提供所述方法制得的绞股蓝甜味素。

本发明的第三个目的是提出绞股蓝甜味素的应用。

本发明甜味物质甜味强度高、甜感阈值低，口感纯正、回味悠长。甜味绞股蓝甜味物质主要结构为葡萄糖6-醛酸乙酯-1,4-α-D半乳糖，是天然非糖类甜味剂，无化学味或金属味，甜度是蔗糖的300~1200倍。

为实现本发明的目的，具体技术方案为采用以下技术步骤。