[发明专利]铁皮石斛种子的小苗计数法

权利要求书

1.一种铁皮石斛种子的小苗计数法，其特征在于将铁皮石斛蒴果中的种子播在培养基表面使其萌发生长成小苗，通过计算小苗的数量得到种子的数量；所述培养基组成为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.5mg/LＮAA+200g/L马铃薯浸出液+20g /L蔗糖+5g /L琼脂，pH5.8；该法具体包括以下步骤：

<1>培养基制备

按配方制备培养基，并用直径6cm、高10cm的平底玻璃瓶分装，每瓶装25ml，然后置121℃、1.1kg/㎝²的压力下灭菌20min，待用；

<2>种子处理

铁皮石斛蒴果依次用洗洁精水溶液浸泡5min、自来水冲洗15-30min，然后在超净工作台上放入1g/LHgCl₂溶液中灭菌15min，无菌水冲洗5次后，无菌滤纸吸干果实表面水分，待用；

<3>种子播种

将蒴果中的种子接入培养基表面；

<4>种子培养

将接好的培养基放25℃培养室内，在辅助光照10-12小时/天、光照强度1500lux条件下培养；

<5>种子计数

待种子长成小苗，平均株高达5.0 mm，取出全部小苗计数，得到蒴果中种子的数量。