[发明专利]引导组织再生膜及其制备方法

权利要求书

1.一种引导组织再生膜的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

对哺乳动物的皮肤进行预处理后得到真皮层皮片；

对所述真皮层皮片依次进行脱细胞处理、病毒灭活处理和致密收缩处理，得到引导组织再生膜前体，所述引导组织再生膜前体具有光滑面与粗糙面的两面结构，其中，所述脱细胞处理的操作为：对所述真皮层皮片依次进行低渗-高渗盐处理、酶处理以及去污剂处理；以及

将所述引导组织再生膜前体按照粗糙面朝上、光滑面朝下的方式设置在质量百分浓度为0.01％～0.5％的掺锶羟基磷灰石分散液中，室温下震荡1h～24h后取出，洗净后干燥、灭菌，得到引导组织再生膜，其中，所述掺锶羟基磷灰石中Sr/[Ca+Sr]的原子比为0.01～0.1：1。

2.根据权利要求1所述的引导组织再生膜的制备方法，其特征在于，所述对哺乳动物的皮肤进行预处理后得到真皮层皮片的操作为：用机械法对所述哺乳动物的皮肤进行初步脱脂及除毛，接着用取皮机将所述哺乳动物的皮肤去掉0.1mm～0.4mm的表皮与皮下脂肪组织后制成厚度为0.2mm～1mm的真皮层皮片。

3.根据权利要求2所述的引导组织再生膜的制备方法，其特征在于，所述哺乳动物的皮肤为猪、牛、羊或马的皮肤。

4.根据权利要求1所述的引导组织再生膜的制备方法，其特征在于，还包括在对所述真皮层皮片依次进行脱细胞处理、病毒灭活处理和致密收缩处理的操作之前，将所述真皮层皮片浸泡在0℃～8℃的抗生素溶液中过夜的操作；

所述抗生素溶液的溶质为青霉素-链霉素、庆大霉素、妥布霉素、万古霉素或替考拉宁；

所述抗生素溶液的质量百分浓度为0.001％～0.1％。

5.根据权利要求1所述的引导组织再生膜的制备方法，其特征在于，对所述真皮层皮片依次进行脱细胞处理、病毒灭活处理和致密收缩处理的操作中，所述脱细胞处理的操作具体为：将所述真皮层皮片分别在质量百分浓度为0.1％～0.9％氯化钠和质量百分浓度为1.0％～10％氯化钠溶液中循环浸泡1次～3 次，每次浸泡的时间为4h～12h，再将所述真皮层皮片浸泡在质量浓度为0.1％～1.0％的胰蛋白酶溶液或中性酶溶液中，置于5℃～37℃摇床中摇消化12h～48h，接着将所述真皮层皮片在质量浓度为0.1％～1％的去污剂溶液中5℃～37℃洗涤2次～8次，每次洗涤的时间为2h～10h，最后用PBS或者生理盐水清洗所述真皮层皮片4次～10次，每次清洗的时间为2h～10h；其中，所述去污剂为十二烷基磺酸钠、曲拉通或3-[(3-胆固醇氨丙基)二甲基氨基]-1-丙磺酸。

6.根据权利要求1所述的引导组织再生膜的制备方法，其特征在于，对所述真皮层皮片依次进行脱细胞处理、病毒灭活处理和致密收缩处理的操作中，所述病毒灭活处理的操作具体为：将所述真皮层皮片浸入质量百分浓度为0.5％～5％的过氧化氢的乙醇溶液或过氧乙酸的乙醇溶液中，室温下浸泡30min～480min，随后用纯水清洗，并将所述真皮层皮片按照上表皮层朝上、下表皮真皮层朝下的方式固定后-80℃～-20℃预冷2h～12h，最后冷冻干燥24h～48h，其中，所述过氧化物为过氧化氢或过氧乙酸。

7.根据权利要求1所述的引导组织再生膜的制备方法，其特征在于，所述病毒灭活处理的操作具体为：将所述真皮层皮片按照上表皮层朝上、下表皮真皮层朝下的方式固定后-80℃～-20℃预冷2h～12h，接着冷冻干燥24h～48h，最后对冷冻干燥后的所述真皮层皮片进行干热灭活，所述干热灭活的温度为50℃～120℃，所述干热灭活的时间为3h～48h。

8.根据权利要求1所述的引导组织再生膜的制备方法，其特征在于，对所述真皮层皮片依次进行脱细胞处理、病毒灭活处理和致密收缩处理的操作中，所述致密收缩处理的操作具体为：将所述真皮层皮片按照上表皮层朝上、下表皮真皮层朝下的方式放置后以压力为5MPa～50MPa保压12h～48h，随后将所述真皮层皮浸没在丙酮中15min～600min，然后干燥。

9.根据权利要求1所述的引导组织再生膜的制备方法，其特征在于，所述洗净后干燥、灭菌的操作中，所述干燥为冷冻干燥，所述灭菌为钴60或高能电子辐照灭菌。

10.一种引导组织再生膜，其特征在于，所述引导组织再生膜采用如权利要求1～9中任一项所述的引导组织再生膜的制备方法制备得到。