[发明专利]引导组织再生膜及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及医疗材料领域，特别是涉及一种引导组织再生膜及其制备方法。

背景技术

引导组织再生技术(Guided Tissue Regeneration，GTR)是目前能够有效治疗牙周病的一种最为先进的治疗方法，其技术关键是利用生物屏障膜即组织再生引导膜的空间隔离作用，防止牙龈上皮和结蹄组织细胞向根面迁移，同时选择性地使牙周细胞和牙槽骨细胞粘附于根面并分化形成牙周新附着。因此引导膜的作用至关重要。随着GTR技术在临床越来越广泛的应用，引导膜的类型及性能已成为制备其发展的关键因素。

传统的临床所用的引导膜主要分为可吸收和不可吸收两类。由于不可吸收引导膜如膨化聚四氟乙烯植入后需要二次手术取出，给病人带来不必要的痛苦和经济心理负担，因此可吸收引导膜逐渐成为今后GTR发展的主要趋势。胶原是结蹄组织的主要成分，作为引导组织再生膜，具有其他可吸收材料无法比拟的生物活性和生物相容性，但是其力学强度差、体内降解速度过快成为是制约其应用的一大难题。近年来随着脱细胞生物技术的兴起和发展，动物脱细胞基质具有天然组织的三维结构，具有良好的力学性能和具有更适宜组织生长的三维结构，因而成为引导膜技术开发新的研究热点。

随着临床技术的不断更新，对引导组织再生膜功能的要求也不断提升。引导组织再生膜不仅只起到屏障隔离的作用，还是一种引导骨组织再生和修复的材料。因而，要求引导组织再生膜具有一定的骨诱导骨传导功能，以促进缺损骨的修复，缩短治疗周期同时也减少病人的痛苦和经济心理负担。

发明内容

基于此，有必要提供一种具有骨诱导功能的引导组织再生膜及其制备方法。

一种引导组织再生膜的制备方法，包括如下步骤：

对哺乳动物的皮肤进行预处理后得到真皮层皮片；

对所述真皮层皮片依次进行脱细胞处理、病毒灭活处理和致密收缩处理，得到引导组织再生膜前体，所述引导组织再生膜前体具有光滑面与粗糙面的两面结构，其中，所述脱细胞处理的操作为：对所述真皮层皮片依次进行低渗-高渗盐处理、酶处理以及去污剂处理；以及

将所述引导组织再生膜前体按照粗糙面朝上、光滑面朝下的方式设置在质量百分浓度为0.01％～0.5％的掺锶羟基磷灰石分散液中，室温下震荡1h～24h后取出，洗净后干燥、灭菌，得到引导组织再生膜，其中，所述掺锶羟基磷灰石中Sr/[Ca+Sr]的原子比为0.01～0.1：1。

在一个实施例中，所述对哺乳动物的皮肤进行预处理后得到真皮层皮片的操作为：用机械法对所述哺乳动物的皮肤进行初步脱脂及除毛，接着用取皮机将所述哺乳动物的皮肤去掉0.1mm～0.4mm的表皮与皮下脂肪组织后制成厚度为0.2mm～1mm的真皮层皮片。

在一个实施例中，所述哺乳动物的皮肤为猪、牛、羊或马的皮肤。

在一个实施例中，还包括在对所述真皮层皮片依次进行脱细胞处理、病毒灭活处理和致密收缩处理的操作之前，将所述真皮层皮片浸泡在0℃～8℃的抗生素溶液中过夜的操作；

所述抗生素溶液的溶质为青霉素-链霉素、庆大霉素、妥布霉素、万古霉素或替考拉宁；

所述抗生素溶液的质量百分浓度为0.001％～0.1％。

在一个实施例中，对所述真皮层皮片依次进行脱细胞处理、病毒灭活处理和致密收缩处理的操作中，所述脱细胞处理的操作具体为：将所述真皮层皮片分别在质量百分浓度为0.1％～0.9％氯化钠和质量百分浓度为1.0％～10％氯化钠溶液中循环浸泡1次～3次，每次浸泡的时间为4h～12h，再将所述真皮层皮片浸泡在质量浓度为0.1％～1.0％的胰蛋白酶溶液或中性酶溶液中，置于5℃～37℃摇床中摇消化12h～48h，接着将所述真皮层皮片在质量浓度为0.1％～1％的去污剂溶液中5℃～37℃洗涤2次～8次，每次洗涤的时间为2h～10h，最后用PBS或者生 理盐水清洗所述真皮层皮片4次～10次，每次清洗的时间为2h～10h；其中，所述去污剂为十二烷基磺酸钠、曲拉通或3-[(3-胆固醇氨丙基)二甲基氨基]-1-丙磺酸。

在一个实施例中，对所述真皮层皮片依次进行脱细胞处理、病毒灭活处理和致密收缩处理的操作中，所述病毒灭活处理的操作具体为：将所述真皮层皮片浸入质量百分浓度为0.5％～5％的过氧化氢的乙醇溶液或过氧乙酸的乙醇溶液中，室温下浸泡30min～480min，随后用纯水清洗，并将所述真皮层皮片按照上表皮层朝上、下表皮真皮层朝下的方式固定后-80℃～-20℃预冷2h～12h，最后冷冻干燥24h～48h，其中，所述过氧化物为过氧化氢或过氧乙酸。