[发明专利]一种防治苹果树腐烂病的生防菌发酵液的制备方法在审
申请号: | 201510794468.7 | 申请日: | 2015-11-16 |
公开(公告)号: | CN105284902A | 公开(公告)日: | 2016-02-03 |
发明(设计)人: | 赵晓军;殷辉;周建波;张志斌;姚众;秦楠 | 申请(专利权)人: | 山西省农业科学院植物保护研究所 |
主分类号: | A01N63/02 | 分类号: | A01N63/02;A01P3/00;A01P21/00;A01G7/06;A01G17/00;A01N63/00;A01N43/90;A01N43/12 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 030006 山*** | 国省代码: | 山西;14 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 防治 苹果树 腐烂 生防菌 发酵 制备 方法 | ||
1.一种防治苹果树腐烂病的生防菌发酵液的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
S1、培养基的制备:
NA培养基:称取酵母浸膏10.0g,牛肉浸膏15.0g,MgSO4·7H2O0.5g,FeSO4·7H2O0.009g,琼脂粉8.5g,葡萄糖30g混合后,用酸度计测,加NaOH或HCl调节pH至6.5,加水定容至1L,分装于250mL三角瓶中,装瓶量为80mL,121℃高压蒸汽灭菌20min;
NB培养基:称取酵母浸膏10.0g,牛肉浸膏15.0g,MgSO4·7H2O0.5g,FeSO4·7H2O0.009g,葡萄糖30g混合后,用酸度计测,加NaOH或HCl调节pH至6.5,加水定容至1L,分装于250mL三角瓶中,装瓶量为80mL,121℃高压蒸汽灭菌20min;
S2、拮抗菌株的活化:
将菌株LF17、LF18的菌株接种在NA培养基上,25℃恒温培养2d,其中,枯草芽孢杆菌LF17的保藏号为NO:SAASIPPLF17;枯草芽孢杆菌LF18的保藏号为NO:SAASIPPLF18;
S3、拮抗菌株的液体培养:
挑取步骤S2中活化的菌株LF17、LF18接种于装瓶量为80mL/250mL的NB培养基;150r·min-1,25℃恒温振荡培养5d,得到发酵液。
S4、过滤浓缩发酵液:
将步骤S3中制备的发酵液,经滤纸过滤后,浓缩为1.5倍的原发酵液浓度和3.0倍的原发酵液浓度的浓缩发酵液,4℃条件下保存备用;
S5、拮抗菌发酵液田间防治药剂的制备:
将步骤S4所得的1.5倍的原发酵液浓度的浓缩发酵液与青霉素钠0.001g·mL-1、溶液质量为3%-5%的矿物油、溶液质量为2%-3%的吐温80混合搅拌均匀,装瓶备用;
S6、拮抗菌发酵液膏剂田间防治药剂的制备:
将步骤S4所得的1.5倍的原发酵液浓度的浓缩发酵液与青霉素钠0.001g·mL-1、溶液质量为3%-5%的矿物油、溶液质量为2%-3%的吐温80、溶液质量为0.5%的黄原胶混合搅拌均匀制成膏剂,装瓶备用。
2.如权利要求1所述的一种防治苹果树腐烂病的生防菌发酵液的制备方法,其特征在于,所得拮抗菌发酵液防治药剂的使用方法为:
果树休眠期进行田间防治实验,在苹果树病疤周围延出0.5cm处用刀割深达木质部的保护圈,然后将圈内的病皮和健皮彻底刮除,尽量使伤口形状纵长、横窄,且周边圆滑,刮掉的病组织集中烧毁;
刮除病组织后,在已暴露的木质部涂少量上述配置好的拮抗菌发酵液防治药剂,稍等2-3分钟,待药剂渗入后,用刀刮除木质部残留的病斑褐变组织,直到褐变组织完全刮完;在刮好的病斑处涂抹上述配置好的拮抗菌发酵液防治药剂,使药剂完全覆盖病斑病外延1.5cm,处理后每10天,再涂2次拮抗菌发酵液膏剂田间防治药剂或发酵液防治药剂。
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