[发明专利]具有温敏性能的胶原蛋白敷料及其制备方法

权利要求书

1.一种具有温敏性能的胶原蛋白敷料，其特征在于：所述胶原蛋白敷料的原料按重量份数比计包括1份的胶原蛋白酶解液、16～25份的N-异丙基丙烯酰胺、70～90份的纯化水；0.05～0.1份的N,N-亚甲基双丙烯酰胺、0.002～0.01份的过硫酸铵和0.002～0.01份的四甲基乙二胺；其中，所述胶原蛋白酶解液的浓度为7～8mg/mL；其中，所述胶原蛋白酶解液的制备方法，包括以下步骤：

1)去除牛跟腱上的粗皮毛和皮下脂肪，将牛跟腱置于脱脂剂中进行脱脂处理，水洗，其中，所述脱脂剂是丙酮和乙醇按重量比3～1︰1混合而成；

2)将洗净的牛跟腱倒入组织捣碎机中在8000～14000rpm/min条件下搅拌10～30min成糊状，再将糊状的牛跟腱和5％NaCl溶液按重量比1︰10～20混合均匀，然后置于搅拌机上搅拌12～24h，过滤，用蒸馏水重复冲洗3～5次，沥干，得到处理料；

3)向处理料按质量比加入1份0.5～0.8mol/L的冰醋酸和3份600～700mg/L的胃蛋白酶的混合物；室温持续搅拌20～30h得到反应液，再利用0.5～0.8mol/L的冰醋酸调节反应液的pH至5；

4)向反应液中加入NaCl饱和溶液，搅拌20～30h，离心弃上清，得到沉淀物；再向沉淀物中滴加摩尔浓度为0.5～0.8mol的冰醋酸使一级沉淀物完全溶解，离心，取上清液并用0.5～0.8mol/L的冰醋酸调节pH至7.5；

5)向上清液中加入NaCl饱和溶液，搅拌20～30h，离心弃上清，得到沉淀物，再向沉淀物中滴加摩尔浓度为0.5～0.8mol/L的冰醋酸使沉淀物完全溶解，得到溶解液；

6)以蒸馏水为透析外液对溶解液透析24～30h，即得胶原蛋白酶解液。

2.根据权利要求1所述具有温敏性能的胶原蛋白敷料，其特征在于：所述胶原蛋白敷料的原料按重量份数比计包括1份的胶原蛋白酶解液、16～22份的N-异丙基丙烯酰胺、0.06～0.08份的N,N-亚甲基双丙烯酰胺、0.004～0.01份的过硫酸铵、0.004～0.008份的四甲基乙二胺和75～95份的纯化水。

3.根据权利要求2所述具有温敏性能的胶原蛋白敷料，其特征在于：所述胶原蛋白敷料的原料按重量份数比计包括1份的胶原蛋白酶解液、18份的N-异丙基丙烯酰胺、0.07份的N,N-亚甲基双丙烯酰胺、0.005份的过硫酸铵、0.005份的四甲基乙二胺和80份的纯化水。

4.一种具有温敏性能的胶原蛋白敷料的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

1)胶原蛋白酶解液的制备方法，包括以下步骤：

a.去除牛跟腱上的粗皮毛和皮下脂肪，将牛跟腱置于脱脂剂中进行脱脂处理，水洗，其中，所述脱脂剂是丙酮和乙醇按重量比3～1︰1混合而成；

b.将洗净的牛跟腱倒入组织捣碎机中在8000～14000rpm/min条件下搅拌10～30min成糊状，再将糊状的牛跟腱和5％NaCl溶液按重量比1︰10～20混合均匀，然后置于搅拌机上搅拌12～24h，过滤，用蒸馏水重复冲洗3～5次，沥干，得到处理料；

c.向处理料按质量比加入1份0.5～0.8mol/L的冰醋酸和3份600～700mg/L的胃蛋白酶的混合物；室温持续搅拌20-30h得到反应液，再利用0.5～0.8moL/L的冰醋酸调节反应液的pH至5；

d.向反应液中加入NaCl饱和溶液，搅拌20～30h，离心弃上清，得到沉淀物；再向沉淀物中滴加摩尔浓度为0.5～0.8mol的冰醋酸使一级沉淀物完全溶解，离心，取上清液并用0.5～0.8mol/L的冰醋酸调节pH至7.5；

e.向上清液中加入NaCl饱和

溶液，搅拌20～30h，离心弃上清，得到沉淀物，再向沉淀物中滴加摩尔浓度为0.5～0.8mol/L的冰醋酸使沉淀物完全溶解，得到溶解液；

f.以蒸馏水为透析外液对溶解液透析24～30h，即得胶原蛋白酶解液；

2)按重量份数比计称取1份的胶原蛋白酶解液、16～25份的N-异丙基丙烯酰胺、0.05～0.1份的N,N-亚甲基双丙烯酰胺、0.002～0.01份的过硫酸铵、0.002～0.01份的四甲基乙二胺和70～90份的纯化水，备用；其中，胶原蛋白酶解液的浓度为7～8mg/mL；

3)将胶原蛋白酶解液和N-异丙基丙烯酰胺溶解于纯化水中，搅拌均匀，得到混合液；

4)向混合液中加入N,N-亚甲基双丙烯酰胺，在氮气保护下机械搅拌10～30min使各组分混合均匀；继续搅拌同时加入过硫酸铵和四甲基乙二胺，并在30～38℃水浴中充氮反应6～8h，得到反应液；

5)将反应液平铺于不锈钢托盘中，于-40℃条件下冻干，即制得胶原蛋白敷料。