[发明专利]一种分隔固定多种酶的方法有效
申请号: | 201510812888.3 | 申请日: | 2015-11-22 |
公开(公告)号: | CN105296462B | 公开(公告)日: | 2018-12-25 |
发明(设计)人: | 杨万泰;朱兴;赵长稳;马育红 | 申请(专利权)人: | 北京化工大学 |
主分类号: | C12N11/18 | 分类号: | C12N11/18;C12N11/08 |
代理公司: | 北京思海天达知识产权代理有限公司 11203 | 代理人: | 刘萍 |
地址: | 100029 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 分隔 固定 多种 方法 | ||
1.一种分隔固定多种酶的方法,其特征在于包括以下步骤:
(1)将异丙基硫杂蒽酮的丙酮溶液均匀地涂覆在聚合物膜的一侧,然后将涂覆有异丙基硫杂蒽酮的丙酮溶液的膜置于两片石英片之间,随后将此体系置于汞灯下室温照射1-5分钟,光强为0.9mW/cm2-9mW/cm2,引入表面可见光休眠基;
(2)将含有游离酶A的单体可聚合溶液涂敷在接枝有异丙基硫杂蒽酮的聚合物膜一侧,然后将涂覆有溶液的膜置于两片透光片之间,随后将此体系置于可见光灯下室温照射20-180分钟,光强为0.3mW/cm2-3mW/cm2,对酶A进行网布固定;
(3)将含有游离酶B的单体可聚合溶液涂敷在包埋有酶A的网布层之上,然后将涂覆有溶液的膜置于两片透光片之间,随后将此体系置于可见光灯下室温照射20-180分钟,光强为0.3mW/cm2-3mW/cm2,在酶A网布层上对酶B进行网布固定;
步骤(1)中所述异丙基硫杂蒽酮的丙酮溶液浓度为0.5-4M;
步骤(2)和(3)中所述的单体为聚乙二醇二丙烯酸酯,聚乙二醇双甲基丙烯酸酯或亚甲基双丙烯酰胺;
步骤(2)和(3)中所述单体可聚合溶液组成如下:酶质量百分含量为0.01%-20%,可聚合单体的质量百分含量为20%-60%,余量为水或pH范围为4-9的缓冲溶液。
2.根据权利要求1所述的分隔固定多种酶的方法,其特征在于:步骤(1)中所使用的聚合物膜为聚合物片材、多孔膜、纺织品或非织造织物。
3.根据权利要求1所述的分隔固定多种酶的方法,其特征在于:步骤(2)和(3)中所述的透光片为石英片或带有可透光图案化的掩膜。
4.根据权利要求1所述的分隔固定多种酶的方法,其特征在于:步骤(2)和(3)中所述的可见光灯为氙灯或LED灯。
5.根据权利要求1所述的分隔固定多种酶的方法,其特征在于还包括以下步骤:
将含有游离酶C的单体可聚合溶液涂敷在包埋有酶B的网布层之上,然后将涂覆有溶液的膜置于两片透光片之间,随后将此体系置于可见光灯下室温照射20-180分钟,光强0.3mW/cm2-3mW/cm2在酶B网布层上对酶C进行网布固定。
6.根据权利要求5中所述的分隔固定多种酶的方法,其特征在于还包括以下步骤:
在包埋有酶C的网布层之上进一步分层固定不同种类酶。
7.一种分隔固定多种酶的方法,其特征在于包括以下步骤:将异丙基硫杂蒽酮的丙酮溶液均匀地涂覆在聚合物膜的两侧,然后将涂覆有异丙基硫杂蒽酮的丙酮溶液的膜置于两片石英片之间,随后将此体系置于汞灯下室温照射1-5分钟,光强为0.9mW/cm2-9mW/cm2,膜正反面皆引入表面可见光休眠基;之后将含有游离酶A的单体可聚合溶液涂覆在聚合物膜的一侧,将含有游离酶B的单体可聚合溶液涂覆在膜的另一侧,随后将此体系置于可见光灯下室温照射20-180分钟,对酶A酶B进行分隔固定;
所述异丙基硫杂蒽酮的丙酮溶液浓度为0.5-4M;
所述的单体为聚乙二醇二丙烯酸酯,聚乙二醇双甲基丙烯酸酯或亚甲基双丙烯酰胺;
所述单体可聚合溶液组成如下:酶质量百分含量为0.01%-20%,可聚合单体的质量百分含量为20%-60%,余量为水或pH范围为4-9的缓冲溶液。
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