[发明专利]水牛特异性引物、试剂盒及其在水牛源性成分鉴定中的应用

权利要求书

1.水牛特异性引物，其特异性扩增SEQ ID No.1所示的核苷酸序列，所述引物序列如下：

BUBALUS-F：5′-GAAGAAGAGGGAGGGGTAGACAA-3′

BUBALUS-R：5′-CAGAACTAGTGAAGGCGGCA-3′。

2.含有权利要求1所述特异性引物的检测试剂盒。

3.根据权利要求2所述的检测试剂盒，其特征在于，其还包括下述试剂中的一种或多种：Taq酶、dNTPs、MgCl₂、PCR缓冲液、阳性对照DNA模板、双蒸水；或者还包括下述试剂中的一种或多种：Taq DNA MasterMix、阳性对照DNA模板、双蒸水。

4.根据权利要求3所述的检测试剂盒，其特征在于，所述阳性对照DNA模板为牛科水牛属的水牛基因组DNA模板，双蒸水为空白对照。

5.根据权利要求1所述的水牛特异性引物或权利要求2～4任一项所述的检测试剂盒在水牛源性成分鉴定中的应用。

6.水牛源性成分的PCR检测方法，其步骤如下所述：

1)提取样品基因组DNA；

2)用权利要求1所述的引物进行PCR扩增，并以水牛DNA模板为阳性对照，以双蒸水为空白对照；

3)对PCR扩增产物进行检测和结果判定。

7.根据权利要求6所述的PCR检测方法，其中步骤2)PCR扩增的反应体系如下：

PCR反应程序如下：

94℃预变性5min；94℃变性30s，60℃退火30s，72℃延伸13s，30次循环；4℃降温2min。