[发明专利]一种信号肽及其在利用魔芋粉产γ-氨基丁酸重组菌中的应用在审
申请号: | 201510817132.8 | 申请日: | 2015-11-23 |
公开(公告)号: | CN105255957A | 公开(公告)日: | 2016-01-20 |
发明(设计)人: | 饶志明;郑俊贤;徐美娟;杨套伟;张显 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12P13/00 | 分类号: | C12P13/00;C12N1/20;C12R1/13 |
代理公司: | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人: | 耿晓岳 |
地址: | 214122 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 信号肽 及其 利用 魔芋 氨基 丁酸 重组 中的 应用 | ||
1.一种提高微生物利用魔芋粉合成产物的方法,其特征在于,所述方法是将信号肽与β-甘露聚糖酶基因融合,然后将融合片段连接到表达载体上并转化到宿主微生物内得到重组微生物,利用重组微生物在以魔芋粉为主要碳源的培养基中发酵生产产物;
所述信号肽的核苷酸序列是(a)~(d)中任意一项:
(a)SEQIDNO:1所示的序列,
(b)包含SEQIDNO:1所示的碱基序列、并且具有信号肽活性的DNA,
(c)包含在SEQIDNO:1所示的碱基序列中缺失、取代或添加至少1个碱基所得的碱基序列、
并且具有信号肽活性的DNA,
(d)与SEQIDNO:1所示的碱基序列在严紧条件下杂交、并且具有信号肽活性/来源于枯草芽
孢杆菌属细菌的DNA。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述β-甘露聚糖酶基因来源于枯草芽孢杆菌属,但不限于枯草芽孢杆菌属。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述产物为γ-氨基丁酸。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述微生物为天津短杆菌,但不限于天津短杆菌属。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述表达载体为pXMJ19,但不限于pXMJ19。
6.根据权利要求1所述的基因工程菌,其特征在于,所述基因工程菌SW07-1/pMSPman-pgad,是在SW07-1/pGAD的基础上表达了β-甘露聚糖酶基因。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述培养基中初始含有10g/L魔芋粉和30g/L葡萄糖,在发酵后期通过分批补料方法补加80g/L魔芋粉。
8.一种重组天津短杆菌,其特征在于,所述重组天津短杆菌表达与SEQIDNO:1的信号肽融合的β-甘露聚糖酶;所述信号肽与β-甘露聚糖酶基因融合后,连接到表达载体上并转化到宿主菌内。
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