[发明专利]一种富马酸卢帕他定原料药合成工艺中DMF残留的测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及药品中的溶剂残留采用高效液相色谱法的检查方法，具体是富马酸卢帕他定原料药合成工艺中所用溶剂的DMF采用新开发的高效液相色谱法进行检测。

背景技术

N，N一二甲基甲酰胺,简称DMF,在常温常压下为无色透明的液体、略带氨味，其分子式为C3H7NO，分子量73.10。相对密度0.9445(25℃)。熔点-61℃。沸点152.8℃。闪点57.78℃。蒸气密度2.51。蒸气压0.49kpa(3.7mmHg25℃)。自燃点445℃。折射率1.42817，溶解度参数δ＝12.1。蒸汽与空气混合物爆炸极限2.2～15.2％。与水和通常有机溶剂混溶,与石油醚混合分层。遇明火、高热可引起燃烧爆炸。能与浓硫酸、发烟硝酸剧烈反应甚至发生爆炸。危险标记7(易燃液体)主要用途主要用作工业溶剂，医药工业上用于生产维生素、激素，也用于制造杀虫剂。

本公司研发的3.1类新药富马酸卢帕他定原料药，在合成过程中用到了6种溶剂，其中包含DMF的6种溶剂的名称及相关参数见。

表1(所用溶剂清单)

现有技术的缺陷

常规的溶剂残留均采用气相色谱法，本公司针对上述6种溶剂开发了在同一系统下检测气相色谱条件，但在开发研究过程中，出现了两个技术问题：

一是溶剂的选择DMSO：甲醇、乙醇、四氢呋喃、DMF溶于水，二氯甲烷、甲苯不溶于水，由此只能选择俗称的万能溶剂DMF或DMSO,DMF为待测组分.

二是六种待测组分沸点由65～154℃，采用顶空进样时为保证DMF完全气化，炉温不得低于100℃,温度到100℃时待测样品(富马酸卢帕他定RPT)已发生高温裂解，待测组分DMF还未见有响应，温度升高至110℃时待测组分DMF在系统中有响应，但响应不高，更糟糕的是待测样品(富马酸卢帕他定RPT)高温裂解峰增加到了4个，已经影响到了正常待测组分的检测，产生的测定干扰无法排除。具体测试数据与图谱见表2,图谱见附图1～2。

表2(测定干扰的相关图谱)

发明内容

针对上述运行不便的技术方案，本发明进行了如下改进，一是：溶剂选择为DMF：甲醇、乙醇、四氢呋喃、二氯甲烷、甲苯五种组分采用气相色谱法；二是：重新开发不产生高温裂解待测样品(富马酸卢帕他定RPT)的高效液相色谱法测待测组分DMF。具体如下：

一种富马酸卢帕他定原料药合成工艺中DMF残留的测定方法，包括如下步骤：

取富马酸卢帕他定原料药于具塞滤芯管中，加水密塞振摇并超声5min，3000转滤芯10min，0.45um滤膜过滤后取上清液，作为供试液；

取DMF于量瓶中，加水溶解并稀释至刻度后另取5.0ml于50ml的量瓶中加水稀释至刻度摇匀作为对照液；

量取上述供试液与对照液各5ul按高效液相色谱法依法测定，并记录色谱图至10min，按外标法计算，DMF残留。

高效液相色谱测定的条件为：色谱柱C18(4.6×250mm、5μm)；流动相为甲醇与水；检测波长224nm；进样量5μm；柱温30℃；流速1.0mL/min。

流动相中甲醇与水以梯度运行，具体为，0min，甲醇15份，水85份；10min，甲醇30份，水70份；20min，甲醇100份，水0份；25min，甲醇100份，水0份；35min，甲醇15份，水85份。

溶剂残留测定常规采用气相色谱法，在待测组分多且待测样品性质特殊时无法满足测定要求的情况下。变通思路开发出操作便利，测定结果无干扰的DMF在样品中的残留测定。

供试液配制时选择易溶待测样品中的待测组分，不溶、难溶或微溶待测样品的溶剂，(DMF在水中易溶，富马酸卢帕他定在水中几乎不溶)避开待测样品的溶解浓度过高而导致的色谱柱容量超载、减小测定干扰。

色谱系统运行时间35min，但色谱图只记录至10min(待测组分完全显示后，其它干扰依然洗脱完全，只是不记载在色谱中，这样便于图谱的处理)。

附图说明

图1为DMSO为溶剂，炉温100℃(六种待测组分+样)高温裂解图谱。

图2为DMSO为溶剂，炉温110℃(六种待测组分+样)高温裂解图谱。

图3为RPT原料药中DMF的残留测定溶剂图谱。

图4为RPT原料药中DMF的残留测定对照图谱。

图5为RPT原料药中DMF的残留测定供试液图谱。

图6为RPT原料药DMF的残留测定溶剂色谱图记录至35min时图谱。