[发明专利]地特胰岛素或其类似物的制备方法有效

申请号：	201510835561.8	申请日：	2015-11-25
公开（公告）号：	CN105440125B	公开（公告）日：	2019-09-24
发明（设计）人：	刘海峰;周祥山;黄菁;李志;方喆;应欢;聂洪霞;史兆松	申请（专利权）人：	华润昂德生物药业有限公司;东阿阿胶股份有限公司
主分类号：	C07K14/62	分类号：	C07K14/62
代理公司：	北京思元知识产权代理事务所(普通合伙) 11598	代理人：	余光军
地址：	252201 山***	国省代码：	山东;37
权利要求书：	查看更多	说明书：	查看更多
摘要：
搜索关键词：	类似物酰化地特胰岛素制备氨基胰岛素前体酰化反应双链蛋白胰岛素类似物高效生成碱性环境胰岛素副产物规模化活化酯赖氨酸苏氨酸原料比收率生产成本优化
钻瓜网技术展会专利词库专利权人专利榜在售专利公布日期热门专利

【权利要求书】：

1.地特胰岛素的制备方法，包括以下步骤：(1)将人双链胰岛素前体desB30溶解于水相缓冲液中得到desB30前体溶液，调节desB30前体溶液的pH值后加入有机相，混匀得到混合溶液；(2)向混合溶液中加入活化酯溶液进行选择性酰化反应；(3)终止反应，分离纯化，即得；其特征在于：步骤(1)中调节desB30前体溶液的pH值至9.0；

步骤(1)所述水相缓冲液为磷酸氢二钠缓冲液；

步骤(2)所述选择性酰化反应中，活化酯与人双链胰岛素前体desB30的摩尔比为1∶1；所述活化酯选自肉豆蔻酸丁二酰亚胺酯、棕榈酸N-琥珀酰亚胺基酯或辛酸N-琥珀酰亚胺基酯中的任意一种；所述选择性酰化反应的时间为25-60min。

2.按照权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤(2)所述选择性酰化反应的时间为25-45min。

3.按照权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述磷酸氢二钠缓冲液的浓度为50-120mmol/L，pH值为2-4。

4.按照权利要求3所述的制备方法，其特征在于：所述磷酸氢二钠缓冲液的浓度为100mmol/L，pH值为3。

5.按照权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤(2)所述活化酯溶液是将活化酯溶解于有机相中，使活化酯的浓度为8-12mg/ml；其中，所述有机相选自乙腈、甲醇或乙醇中的任意一种；

步骤(2)所述选择性酰化反应是利用活化酯酰化人双链胰岛素前体desB30的B29位赖氨酸的ε-氨基。

6.按照权利要求5所述的制备方法，其特征在于：步骤(2)所述活化酯溶液是将活化酯溶解于有机相中，使活化酯的浓度为10mg/ml；其中，所述有机相为乙醇。

7.按照权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤(1)所述desB30前体溶液中，人双链胰岛素前体desB30的终浓度为4-8mg/ml。

8.按照权利要求7所述的制备方法，其特征在于：步骤(1)所述desB30前体溶液中，人双链胰岛素前体desB30的终浓度为6mg/ml。

9.按照权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤(1)所述有机相的体积是混合溶液总体积的30-50％；其中，所述有机相选自乙腈、甲醇或乙醇中的任意一种。

10.按照权利要求9所述的制备方法，其特征在于：步骤(1)所述有机相的体积是混合溶液总体积的40％；其中，所述有机相为乙醇。