[发明专利]一种帕瑞昔布钠遗传毒性杂质的检测方法及其应用

说明书

本发明提供了一种帕瑞昔布钠遗传毒性杂质的检测方法及其应用。该方法采用反相液相色谱法，色谱条件如下：色谱柱为C18柱、C8柱、苯基柱和Hilic柱；流动相组成为水—乙腈、稀磷酸—乙腈、磷酸盐—乙腈；流动相配比为水相—有机相90:10～10:90；柱温为25～40℃；流动相流速为0.2‑2ml/min；检测波长为205～290nm；检测器为紫外检测器或二极管阵列(PDA)检测器。进样量为0.1‑40μl。本发明提供的一种帕瑞昔布钠遗传毒性杂质的检测方法，实现了帕瑞昔布钠与3个遗传毒性杂质在较短时间内的分离，具有较高的灵敏度和专属性，操作简捷，达到主成分与遗传毒性杂质、遗传毒性杂质之间的分离度均大于1.5，可用于帕瑞昔布钠的质量控制，具有实用价值。

技术领域

本发明属于药物分析技术领域，具体涉及一种帕瑞昔布钠遗传毒性杂质的检测方法，更具体涉及一种帕瑞昔布钠遗传毒性杂质的反相液相色谱法分析检测方法。

背景技术

非甾体抗炎药(NSAIDs)作为一种镇痛药通常用来治疗急慢性疼痛，其作用机理是通过抑制环氧合酶(COX)而抑制前列腺素类合成与释放，产生镇痛效果。传统的非甾体抗炎药(如萘普生、吲哚美辛、双氯芬酸、尼美舒利等)临床上已应用几十年，但长期使用副作用较明显，会产生消化不良、腹痛等胃肠副作用，严重情况下导致胃穿孔、十二指肠溃疡等疾病，近年来其应用受到限制。

帕瑞昔布钠是一种新型的COX-2特异性抑制剂。COX-2是一种诱导酶，正常情况下在机体大多数组织中无表达或者表达甚微，但当受到刺激后能迅速产生。研究表明，特异性的COX-2抑制剂比非选择性的环氧合酶抑制剂治疗效果更为确切，且副作用更少。在治疗浓度时，帕瑞昔布钠能选择性的抑制COX-2，抑制前列腺素(PG)的合成，从而发挥镇痛和抗炎作用，而对COX-1抑制作用并不明显，现已广泛用于临床上预防和治疗中重度疼痛和术前镇痛。

帕瑞昔布钠(英文名：Parecoxib Sodium)，分子式为C₁₉H₁₈N₂O₄S.Na，分子量为392.40，CAS登录号：198470-85-8。帕瑞昔布钠纯品为白色结晶性粉末，其熔点为273～275℃。其结构如下所示。

杂质研究是原料药质量研究中的关键内容。目前，中国药典及国外药典未收录帕瑞昔布钠原料及制剂的有关物质或遗传毒性杂质的检测方法。在已公开的专利中，CN104749288A公开了一种帕瑞昔布钠有关物质的液相色谱分析方法，控制了4-(5-甲基-3-苯基-4-异恶唑)苯磺酸钠等6个杂质，未检索到任何关于帕瑞昔布钠遗传毒性杂质检测方法的专利。

近年来，原料药质量控制越来越重视对遗传毒性(或称基因毒性)杂质的研究。遗传毒性杂质很低浓度时即可造成人体遗传物质的损伤，进而导致基因突变并可能促使肿瘤的发生。帕瑞昔布钠生产工艺的精制步骤可能会产生含有遗传毒性警示结构——磺酸酯类的杂质(见表1)，要求质量控制特别关注。

由于帕瑞昔布钠常用作术后镇痛药，其治疗时段小于1个月，根据遗传毒性杂质的限度控制规定，遗传毒性杂质的可接受摄入量为120μg/天。注射用帕瑞昔布钠的最大日剂量为80mg，折算其遗传毒性杂质的控制限度为单一杂质(或总杂质)不超过1500ppm。

表1 帕瑞昔布钠遗传毒性杂质

发明内容

本发明的目的是提供一种帕瑞昔布钠3种遗传毒性杂质的检测方法。

本发明的再一个目的是提供一种帕瑞昔布钠3种遗传毒性杂质检测方法的应用。

本发明目的主要通过以下技术方案实现：所述的检测方法采用反相液相色谱法，检测对象、控制限度、样品的配制、色谱柱、流动相组成、柱温、流速、检测波长、进样量等描述如下。