[发明专利]一种基于CoFe2O4纳米粒子的NMR食源性致病菌快速检测方法

权利要求书

1.一种基于CoFe₂O₄纳米粒子的NMR食源性致病菌快速检测方法，其特征是步骤如下：

（1）检测目标菌的CoFe₂O₄纳米粒子的制备；

（2）将目标菌特异性单抗在酶标板上的固定备用，并将多余的活性位点用牛血清蛋白封闭；

（3）将待检样品加到第（2）步所制得的酶标板上，孵育一段时间，若待检样品中含有目标菌，则会与酶标板上的单抗结合，用无菌的去离子水清洗后，目标菌被固定在酶标板上；

（4）将第（1）步制得的CoFe₂O₄纳米粒子悬浊液加到第（3）步固定了目标菌的酶标板上，若存在目标菌则形成双抗夹心，用无菌的去离子水清洗，则没有结合的粒子就被洗掉，若不存在目标菌，则所有粒子都被洗掉；

（5）用洗脱剂将酶标板上的双抗夹心的粒子洗下来，如果还存在粒子就是抓到目标菌的粒子；

（6）第（5）步所得的粒子的悬浊液，进行核磁共振的弛豫时间测定；以无菌的去离子水重复上述步骤作为空白，测得的悬浊液的弛豫时间自旋-晶格弛豫时间和自旋-自旋弛豫时间相比无菌的去离子水有显著降低，则说明含有粒子，从而间接证明样本中有目标菌；粒子的量与自旋-晶格弛豫时间和自旋-自旋弛豫时间的下降呈正比，通过加标定量粒子而间接定量出目标菌的量。

2.根据权利要求1所述的基于CoFe₂O₄纳米粒子的NMR食源性致病菌快速检测方法，其特征是所述粒子为纳米级CoFe₂O₄材料，其纳米粒径小于500纳米。

3.根据权利要求1所述的基于CoFe₂O₄纳米粒子的NMR食源性致病菌快速检测方法，其特征是所述核磁共振弛豫时间，是指自旋-晶格弛豫时间和自旋-自旋弛豫时间。