[发明专利]检测食源性水中S2‑的荧光探针的制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种荧光探针及其制备方法和应用，具体涉及一种检测食源性水中S^2-的荧光探针及其制备方法和应用。

背景技术

含硫有机物分解或硫酸盐类物质还原而生成的硫化物，即含有S^2-的物质具有一定的毒性，微摩尔浓度的含S^2-物质的存在已可对水生生物和人类造成伤害（Wang F et.al. Env. Toxi. Chem. 1999, 18(11): 2526-2532.）。S^2-超标的水或者食物可造成人体内细胞色素、氧化酶等物质中二硫键的破坏，造成细胞组织严重缺氧，导致人体四肢麻痹甚至休克。《地表水环境质量标准》要求食用水源中硫化物的含量不得高于0.05mg/L，因此，检测食用性水源中S^2-的含量越来越受到重视。

目前，水中S^2-的检测方法发展迅速，已报道的有毛细管电泳法，光纤传感器法，离子色谱法，离子选择性电极法，气相色谱法，流动注射分析法、电感耦合等离子体原子发射光谱法等，被用于国家标准的有气相分子吸收光谱法（HJ/T200-2005）、对氨基二甲基苯胺比色法（GB/T 30376-2013）和碘量法（MT/T 371-2005）。这些分析方法中，要么需要用复杂的仪器设备，要么分析过程步骤繁杂，且有的方法的灵敏度并不高，比如对氨基二甲基苯胺比色法对水中硫离子的浓度检测范围为0.08～1.00 mg/L，碘量法测定水中硫离子的浓度范围为1.00 mg以上（参见MT/T 371-2005）。因此，发展简单易行、检测成本低、选择性好、灵敏度高的硫化物分析方法具有重要的应用价值。

近年来，荧光化学传感器技术的发展带动了一批有机荧光物质的出现，例如三氰基二氧呋喃，2,7-二醋酸汞基荧光素，α,β-不饱和醛酮等有机类化合物用于检测水溶液中S^2-的浓度。但是，此类化合物水溶液中溶解度低，需要用有机溶剂溶解，且此类化合物合成步骤复杂，合成过程需要大量的有机试剂，造成环境污染。因此，研发环境友好型可用于食用性水源检测的荧光传感器具有非常重要的意义。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是，克服现有技术存在的上述缺陷，提供一种检测灵敏度高，成本低，选择性好，抗干扰，环境友好的检测食源性水中S^2-的荧光探针。

本发明进一步要解决的技术问题是，克服现有技术存在的上述缺陷，提供一种步骤简单、成本低的检测食源性水中S^2-的荧光探针的制备方法。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案如下：一种检测食源性水中S^2-的荧光探针，由Cu²⁺与含有至少3个组氨酸和至少1个色氨酸的多肽络合而成，且色氨酸的位置在组氨酸之间。

进一步，所述含有至少3个组氨酸和至少1个色氨酸，且色氨酸的位置在组氨酸之间的多肽氨基酸序列为：组氨酸-组氨酸-色氨酸-组氨酸、组氨酸-丝氨酸-色氨酸-甘氨酸-组氨酸-谷氨酰胺-组氨酸或丝氨酸-组氨酸-色氨酸-组氨酸-甘氨酸-组氨酸-谷氨酸等。

进一步，所述Cu²⁺与组氨酸-组氨酸-色氨酸-组氨酸络合所得荧光探针的分子结构式如下所示：

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所述Cu²⁺与组氨酸-丝氨酸-色氨酸-甘氨酸-组氨酸-谷氨酰胺-组氨酸络合所得荧光探针的分子结构式如下所示：

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所述Cu²⁺与丝氨酸-组氨酸-色氨酸-组氨酸-甘氨酸-组氨酸-谷氨酸络合所得荧光探针的分子结构式如下所示：

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进一步，所述多肽采用多肽固相合成法。

本发明进一步解决其技术问题所采用的技术方案如下：检测食源性水中S^2-的荧光探针的制备方法，将多肽水溶液和CuSO₄的H₂SO₄溶液以多肽:Cu²⁺的摩尔比为1.0～1.2:1的比例，与4-羟乙基哌嗪乙磺酸缓冲溶液混合，即成。