[发明专利]一种金针菇固体转液体的接种方法

说明书

本发明公开了一种金针菇固体转液体的接种方法，经（1）试管培养、（2）平板培养、（3）接种、（4）三角瓶液体培养后，即可用于生产或扩繁。本发明工艺简单，接种简便，有效避免了杂菌感染的可能，同时还能最大限度保证菌种的活力，不会出现菌丝被烫死等情况，接种后的液体三角瓶长势良好，菌球颗粒大小均匀，菌丝旺盛，适合进行大规模的生产。

技术领域

本发明涉及一种金针菇固体转液体的接种方法，属于栽培技术类。

背景技术

目前，固体菌种的生产工艺一般是由试管母种扩繁成一级种，二级种、三级种，生产周期长、污染率高、成本高、需大量人工和场地，并且管理困难，很难适应大规模生产的需要。而液体菌种生产设备和技术已经推广多年，拥有液体菌种生产设备的单位和个人不计其数。液体菌种优点很多，例如：食用菌菌种的液体培养可以大大的缩短周期，产量巨大，并且可以大规模生产，液体培养还可以减少杂菌污染，大大的为经营这节约时间。

但是，该液体菌种生产的技术依然存在不足，还需继续研究，比如：实际上成功长期应用于生产的仍很少，这说明液体菌种设备和技术在生产中存在较大的探讨空间，究竟是设备问题还是技术问题、还是液体菌种与栽培技术的结合问题。本发明就金针菇固体转液体的接种方法作探讨，以期得到一个优良的接种方法，避免液体菌种生产中出现的诸多问题。

发明内容

针对上述现存的技术问题，本发明提供一种金针菇固体转液体的接种方法，通过斜面菌种接种到液体培养基中，以提高液体菌种生产的活力。

为实现上述目的，本发明提供的金针菇固体转液体的接种方法，包括如下具体步骤：

一、试管培养：

（1-1）制作斜面试管：500ml斜面试管培养料的原料为：斜面试管专用培养基19.5g、细菌琼脂2.5g、纯净水500ml，ph值自然，将培养料充分搅拌，并在微波炉中加热至溶液呈透明状后，取出分装到20×200mm的试管中，每支试管装13ml培养基，塞上胶塞封上报纸，于121℃条件下灭菌20min；

（1-2）接种：将灭菌后的试管趁热摆成斜面，待温度降至室温后开始接种，接种前超净工作台紫外灯消毒20min，于超净工作台中接种，每支试管接种面积为3mm×3mm×3mm的正方体菌种块；

（1-3）培养：将接种好的试管放于17℃下的恒温培养箱静置培养7天，即可用于接种平板培养基。

二、平板培养：

（2-1）制作平板培养基：500ml平板培养基培养料的原料为：斜面试管专用培养基19.5g、细菌琼脂2.5g、纯净水500ml，ph值自然，将培养料充分搅拌，并在微波炉中加热至溶液呈透明状后，取出分装到20×200mm的试管中，每支试管装20ml培养基，塞上胶塞封上报纸，于121℃条件下灭菌20min；

（2-2）接种：将灭菌后的试管中的培养基趁热倒入平板中，待平板凝固降至室温后开始接种；接种前超净工作台紫外灯消毒20min，于超净工作台中接种；将接种针深入培养至7天的母种斜面试管，刮掉斜面表面的气生菌丝，将靠近试管口没有菌丝覆盖的培养基质切开弃除，选取靠近接种点附近布满菌丝的培养基画井字形，以长宽高各3mm均匀切块，然后放入平板培养基中央，封上密封条，一支试管转接6个平板培养基；

（2-3）培养：将接种好的平板放于17℃下的恒温培养箱静置培养7天左右，即可用于液体三角瓶。

三、接种：

3-1、液体准备：

（3-1-1）配料：每1000ml液体三角瓶培养液所需配料为：白糖20g、豆奶宝3.3g、磷酸二氢钾0.66g、硫酸镁0.66g，称取各种原料进行配料；