[发明专利]一种制备高效水解活力施氏假单胞菌的细胞固定化方法

权利要求书

1.一种制备高效水解活力施氏假单胞菌的细胞固定化方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）施氏假单胞菌经活化培养、发酵培养得到菌液，菌液离心分离得菌体，菌体干燥备用；所述发酵培养的培养基中各成分的质量体积分数为：葡萄糖0.1 %~5 %，酵母浸膏0.1 %~5 %，(NH₄)₂SO₄ 0.2 %~3 % ，K₂HPO₄ 0.02 %~1 %，MgSO₄·7H₂O 0.002 %~0.2 %，其余成分为水；培养基中初始pH值为6.0~8.0；所述施氏假单胞菌为Pseudomonas stutzeri GIM1.273;所述发酵培养条件为温度20℃~40℃，转速120~200 r/min，震荡培养0.5 d~3 d;

（2）将步骤（1）得到的菌体接入经高压灭菌冷却的海藻酸钠与PVA的混合溶液中，混匀后注入搅拌的饱和硼酸-CaCl₂溶液中固定化，过滤得到小珠后用蒸馏水洗涤，再经冷冻干燥制得固定化施氏假单胞菌细胞催化剂； 所述的海藻酸钠与PVA在所述混合溶液中的质量体积分数分别为0.5 %~8 %与 3 %~12 %；所述固定化的温度为0 ℃~ 10 ℃，固定化的时间为0.5 h~24 h; 所述的海藻酸钠与PVA的混合溶液为固定化载体，其中固定化载体与施氏假单胞菌干重比为（50 ~ 250） : 1; 所述的饱和硼酸-CaCl₂溶液为交联剂，所述交联剂中CaCl₂浓度为0.05 mol/L~1.0 mol/L，硼酸为饱和硼酸溶液。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述细胞固定化方法联合采用了包埋法和交联法。