[发明专利]一种植物萃取物复合益生菌分时发酵培养方法

说明书

本发明公开了一种植物萃取物复合益生菌分时发酵培养方法，该方法通过一级种子液的制备；二级种子液的制备；发酵培养基的制备及发酵培养基的制备及发酵等步骤，在发酵接种时通过分时接种发酵方法，解决了发酵过程中动物双歧杆菌含量较低的问题。通过该方法，发酵液中的动物双歧杆菌含量达到1.0~3×10⁸CFU/ml，比较现有技术中的发酵方法，动物双歧杆菌的数量提高了约100倍，增强了复合益生菌健康功效。

技术领域

本发明属于微生物发酵领域，特别涉及一种植物萃取物复合益生菌分时发酵培养方法。

背景技术

益生菌是一类对宿主有益的活性微生物，是定植于人体肠道、生殖系统内，能产生确切健康功效从而改善宿主微生态平衡、发挥有益作用的活性有益微生物的总称。可用于食品的益生菌包括链球菌属，乳杆菌属，动物双歧杆菌属等。

植物萃取物复合益生菌发酵饮品是指使用植物萃取物，接种几种不同的益生菌发酵制备的饮品。

现有技术中，由于链球菌属，乳杆菌属，动物双歧杆菌属三种益生菌的生长条件不同，同时接种三种益生菌，在发酵过程中，各种益生菌的数量会造成失衡。尤其是动物双歧杆菌，在培养中属于弱势菌种，这样会导致最终发酵液中的动物双歧杆菌数量比较少，影响复合益生菌健康功效。

发明内容

针对上述现有技术的不足，本发明提供一种植物萃取物复合益生菌分时发酵培养方法，该方法大大提高了动物双歧杆菌的数量，解决了复合益生菌发酵过程中动物双歧杆菌的含量过少的技术问题，增强了复合益生菌健康功效。

本发明的技术方案是：一种植物萃取物复合益生菌分时发酵培养方法，包括以下步骤：

步骤一：一级种子液的制备

取下述重量配比的原料制备而成：

酵母浸粉100份、葡萄糖200份、蔗糖200份、氯化钠50份、磷酸氢二钾20份、硫酸镁5份、 纯化水8625份

按照上述原料配比配制一级种子培养基600ml，平均分装至6个三角瓶中，在温度121℃条件下灭菌30min，灭菌后的一级种子培养基冷却至37℃后备用；

一级种子培养基接种冻存菌种，分别接种动物双歧杆菌，嗜热链球菌，鼠李糖乳杆菌，置于37℃恒温培养箱中，静置培养；培养时间为24小时，得到动物双歧杆菌一级种子液、嗜热链球菌一级种子液、鼠李糖乳杆菌一级种子液，分别取样测定动物双歧杆菌一级种子液、嗜热链球菌一级种子液、鼠李糖乳杆菌一级种子液的pH值；动物双歧杆菌一级种子液pH值介于3.8-4.0之间，嗜热链球菌一级种子液pH值介于3.8-4.2之间，鼠李糖乳杆菌一级种子液pH值介于3.8-4.0之间，用于转接二级种子培养基；

优选地，动物双歧杆菌一级种子液pH值为3.9，嗜热链球菌一级种子液pH值为4.04，鼠李糖乳杆菌一级种子液pH值为3.97，用于转接二级种子培养基；

步骤二：二级种子液的制备

取下述重量配比的原料制备而成：

深色焦香麦芽400份、小麦麦芽200份、黄豆400份、葡萄糖200份、酵母浸粉100份、氯化钠 50份 、 磷酸氢二钾20份、硫酸镁 5份、 纯化水 8625份；

按照上述配比称取深色焦香麦芽和小麦麦芽，先用水冲洗一遍，再加入五倍重量的水浸泡30min，然后微沸萃取一小时，8层纱布过滤，获得深色焦香麦芽和小麦麦芽萃取液；按上述配比称取黄豆，用温水浸泡24小时，待黄豆萌发出芽后冲洗干净，然后加五倍重量的水，微沸萃取1小时，8层纱布过滤，获得黄豆萃取液；按上述配比称取葡萄糖、酵母浸粉、氯化钠、磷酸氢二钾、硫酸镁、纯化水，配制二级种子培养基12L，平均分装至3个三角瓶中，在温度121℃条件下灭菌30min，灭菌后的二级种子培养基冷却至37℃后备用；