[发明专利]突变酶

权利要求书

1.用于氧化作为有机化合物的底物的方法，所述有机化合物选自萘、丙基苯、甲苯、丁基苯、叔丁基苯、乙基苯、邻二甲苯、间二甲苯、对甲基异丙基苯、枯烯、戊烷、3-甲基戊烷、1,4-二氯苯、或朱栾倍半萜，所述方法包括在突变CYP102A1酶和辅助因子NADPH和分子氧存在的情况下氧化所述有机化合物底物，其中所述CYP102A1酶由SEQ ID NO:2的CYP102A1构成；且其中，突变酶包括在SEQ ID NO:2的位置47、51、87、171、307和319处的取代组R47L/Y51F/F87A/H171L/Q307H/N319Y，以增强所述CYP102A1酶的单加氧酶活性。

2.一种突变CYP102A酶，其具有增强的单加氧酶活性，其中所述CYP102A酶由SEQ IDNO:2的CYP102A1构成，且其中，突变酶包括在SEQ ID NO:2的位置47、51、87、171、307和319处的取代组R47L/Y51F/F87A/H171L/Q307H/N319Y，以增强所述CYP102A酶的单加氧酶活性。

3.一种多核苷酸，其包含编码如权利要求1或2所限定的酶的序列，可选地以载体形式。

4.一种细胞，其表达权利要求2所限定的酶。

5.根据权利要求4所述的细胞，其为原核细胞或真核细胞。

6.根据权利要求5所述的细胞，其为大肠杆菌(Escherichia coli)、假单胞菌属(Pseudomonas sp.)、毕赤酵母属(Pichia sp.)、红球菌属(Rhodococcus sp.)、芽孢杆菌属(Bacillus sp.)的菌株。

7.根据权利要求1所述的方法，其中，所述有机化合物底物在根据权利要求4中所述的细胞中氧化。

8.处理被底物所污染的位点的方法，所述底物是有机化合物，所述有机化合物选自萘、丙基苯、甲苯、丁基苯、叔丁基苯、乙基苯、邻二甲苯、间二甲苯、对甲基异丙基苯、枯烯、戊烷、3-甲基戊烷、1,4-二氯苯、或朱栾倍半萜，所述方法包括用根据权利要求2所述的酶、或权利要求4至6中任一项限定的细胞接触所述位点。