[发明专利]一种复合微生物液体饲料添加剂及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于饲料添加剂领域，特别涉及一种复合微生物液体饲料添加剂及其制备方法。

背景技术

为了完善饲料的营养性，提高饲料的利用率，促进动物的生长、疾病的预防和完善饲料的品质，而在饲料中添加了饲料添加剂。目前，饲料添加剂可分为维生素添加剂、微量元素添加剂、氨基酸添加剂、香料及引诱剂、酶制剂、微生态制剂等。微生态制剂主要包括乳酸杆菌，芽孢杆菌，酵母菌等经培养而生产出的一种活菌制剂。微生态制剂种类较多，市场潜力巨大，但对于微生态制剂中液体复合微生物添加剂的研究报道很少。

发明内容

发明目的：本发明是针对现有技术的不足，提出的一种复合微生物液体饲料添加剂及其制备方法。该复合微生物液体饲料添加剂能抑制和阻止肠内有害菌的繁殖，使肠内菌群保持平衡，能使动物粪便中有害气体的浓度得到了有效降低，改善了饲养环境，优化生态环境，通过刺激肠道内免疫系细胞，增强了免疫作用，调节了动物胃肠道的微生态平衡，增强食欲，促进消化，预防疾病。

技术手段：为实现上述技术目的，本发明提出了一种复合微生物液体饲料添加剂，它是将植物乳杆菌、粪肠球菌、嗜酸乳杆菌、凝结芽孢杆菌和侧孢短芽孢杆菌分别进行单菌种培养，得到的种子培养液再分别进行发酵罐培养，最后把它们的培养液按重量百分比混合得到，所述制剂中植物乳杆菌的菌数≥3.0×10⁹cfu/ml，粪肠球菌的菌数≥3.0×10⁹cfu/ml，嗜酸乳杆菌的菌数≥3.0×10⁹cfu/ml，凝结芽孢杆菌的菌数≥3.0×10⁹cfu/ml，侧孢短芽孢杆菌的菌数≥3.0×10⁹cfu/ml，pH值为3.5～4.0。

其中，所述各菌种的种子培养液的重量百分数为：植物乳杆菌的种子培养液25％～35％，粪肠球菌的种子培养液15％～20％，嗜酸乳杆菌的种子培养液25％～35％，凝结芽孢杆菌的种子培养液15％～25％，侧孢短芽孢杆菌的种子培养液10％～15％。

本发明进一步提出了上述的复合微生物液体饲料添加剂的制备方法，包括以下步骤：

(1)种子培养液的制备：

植物乳杆菌、粪肠球菌、嗜酸乳杆菌种子培养液的制备：分别将植物乳杆菌、粪肠球菌、嗜酸乳杆菌在无菌条件下接种于第一液体培养基中，pH调至7.2～7.5，35℃～37℃培养15～18小时，分别得到培养后的的植物乳杆菌的种子培养液含量≥3.0×10⁹cfu/ml，培养后的粪肠球菌的种子培养液含量≥3.0×109cfu/ml，培养后的嗜酸乳杆菌的种子培养液含量≥3.0×10⁹cfu/ml；

凝结芽孢杆菌种子培养液的制备：将凝结芽孢杆菌在无菌条件下接种于第二液体培养基中pH调至7.2～7.5，40℃～45℃培养42～44小时，得到培养后的凝结芽孢杆菌的种子培养液含量≥3.0×10⁹cfu/ml；

侧孢短芽孢杆菌种子培养液的制备：将侧孢短芽孢杆菌在无菌条件下接种于第三液体培养基中，pH调至7.2～7.5，35℃～37℃培养46～48小时，得到的培养后的侧孢短芽孢杆菌的种子培养液含量≥3.0×10⁹cfu/ml；

(2)复合微生物液体饲料添加剂的制备

分别将步骤(1)制备得到的植物乳杆菌、粪肠球菌、嗜酸乳杆菌在无菌条件下分别接种于第一培养基中，pH调至7.2～7.5，接种量为培养基重量的2％，在35℃～37℃的发酵罐中静置培养24～26小时；

凝结芽孢杆菌种子液在无菌条件下接种于第二液体培养基中，接种量为培养基重量的2％，在溶氧度为30％即发酵罐中氧气的体积与发酵液的体积比为30％的条件下，40℃～45℃培养40～44小时，使菌体芽孢出孢率达40％，pH值为4.0～4.5，侧孢短芽孢杆菌的种子液在无菌条件下接种于第三液体培养基中，pH调至7.2～7.5，接种量为培养基重量的2％，在溶氧度为30％即发酵罐中氧气的体积与发酵液的体积比为30％的条件下，35℃～37℃培养36～40小时，使菌体芽孢出孢率达40％，pH值为6.0～7.0；

把制备得到的植物乳杆菌、粪肠球菌、嗜酸乳杆菌、凝结芽孢杆菌和侧孢短芽孢杆菌的培养液按其重量百分数为：植物乳杆菌的培养液25％～35％，粪肠球菌的培养液15％～20％，嗜酸乳杆菌的培养液25％～35％，凝结芽孢杆菌的培养液15％～25％，侧孢短芽孢杆菌的培养液10％～15％混合得到的一种复合微生物液体饲料添加剂。