[发明专利]抗肿瘤免疫治疗纳米给药系统及其构建方法

说明书

本发明公开了一种抗肿瘤免疫治疗纳米给药系统。所述抗肿瘤免疫治疗纳米给药系统包括紫杉醇/阴离子环糊精‑DNA/甘露糖修饰三甲基壳聚糖纳米复合物，由紫杉醇、阴离子环糊精、DNA和甘露糖修饰三甲基壳聚糖组成，所述抗肿瘤免疫治疗纳米给药系统通过所述甘露糖配体靶向树突状细胞。本发明还公开了一种抗肿瘤免疫治疗纳米给药系统的构建方法。本发明提供一种既能增加荷瘤机体抗肿瘤免疫应答，且能抑制或逆转肿瘤免疫逃逸的综合免疫给药系统，且其制备方法简捷，靶向效率高。

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及药物递送系统，具体涉及一种抗肿瘤免疫治疗纳米给药系统及其构建方法。

背景技术

肿瘤免疫治疗是继手术治疗、药物治疗、放射治疗之后的一种新的肿瘤治疗手段，在预防肿瘤复发、转移、治疗肿瘤病灶等方面具有其独特的优势。世界上首个肿瘤治疗性疫苗，即表皮生长因子(EGF)肿瘤治疗性疫苗，已于2008年6月上市。该疫苗可以有效延长晚期肺癌患者的生存期，副反应很轻，且在停药后自动消失，也未发生自身免疫反应症状。可见，肿瘤治疗性疫苗在抗肿瘤治疗具有明显的优势。现有抗肿瘤免疫治疗的研究主要集中在提高机体抗肿瘤免疫应答或者阻止肿瘤免疫逃逸，而肿瘤免疫响应是一个相当复杂机制，单纯一方面的考虑是难以达到抗肿瘤治疗的目的。

未成熟树突状细胞(Dendritic cells，DC)具有抗原递呈作用，它通过对肿瘤抗原或相关质粒DNA内吞，加工处理，形成成熟树突状细胞。有研究表明，抗肿瘤疫苗的免疫效应在体内中不甚理想的主要原因是质粒DNA或多肽在进入细胞核内前就被大量的降解，且肿瘤患者的DC对抗原捕获和DNA的摄取能力较低，这也是为何现有许多抗肿瘤DNA或多肽疫苗无法真正进入临床的主要原因之一。随着纳米技术的不断发展，已有微球、脂质体、纳米粒、囊泡等纳米给药载体包裹DNA、多肽疫苗进行免疫研究的报道，纳米给药系统能增加DC对DNA或多肽的摄取率，且纳米给药载体本身可以作为佐剂诱导增加T细胞反应而增强免疫效应。

DC细胞膜表面分布三种受体：Fc受体、DEC-205受体、甘露糖受体(MMR)，且DC细胞膜的表面带负电荷，表面带正电荷的纳 米给药载体可增加DC对DNA的摄取率和保护作用。通过药剂学及化学合成手段，纳米载体材料上引入甘露糖配体，通过甘露糖受体的介导，将DNA疫苗或多肽疫苗纳米粒直接靶向于DC，增加了DC对DNA疫苗或多肽的细胞摄取。

在肿瘤微环境中存在有许多抑制性的免疫细胞，其中调节性T细胞(RegμLatory TLymphoeyte,Treg)在肿瘤微环境中的比例高，是肿瘤微环境参与构建免疫抑制性重要因素。研究表明阻断Treg增殖、或消除肿瘤部位的Treg能增强抗肿瘤免疫效果。现有研究表明，化学治疗和免疫治疗的结合可以弥补各自治疗过程中的不足，同时可以增加抗肿瘤效果。已报道少量的紫杉醇能消除Treg从而逆转肿瘤免疫逃逸，并促进DC成熟。

综上所述，研制理想的新型给药系统以提高树突状细胞对DNA疫苗或抗原的摄取率，防止DNA或多肽在进入细胞核内前被大量的降解，增加DNA疫苗或多肽进入树突状细胞的量，是目前疫苗研究中迫切需要攻克的课题之一。因此，为达到理想的抗肿瘤免疫治疗效果，有必要提供一种既能增加荷瘤机体抗肿瘤免疫应答，且能抑制或逆转肿瘤免疫逃逸的综合免疫给药系统。

发明内容

为了解决上述现有抗肿瘤DNA或多肽疫苗在体内效应不佳的技术问题，本发明提供一种既能增加荷瘤机体抗肿瘤免疫应答，且能抑制或逆转肿瘤免疫逃逸的抗肿瘤免疫治疗纳米给药系统及其构建方法，并具有制备方法简捷，靶向效率高的优点。

本发明提供一种抗肿瘤免疫治疗纳米给药系统，其特征在于，包括紫杉醇/阴离子环糊精-DNA/甘露糖修饰三甲基壳聚糖纳米复合物，由紫杉醇、阴离子环糊精、DNA和甘露糖修饰三甲基壳聚糖组成，其中，

所述紫杉醇与所述阴离子环糊精以摩尔比1:1比例包合而成紫杉醇/阴离子环糊精包合物；