[发明专利]一套用于耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）检测的多核苷酸、方法和试剂盒

权利要求书

1.一种检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的试剂盒，其特在于，所述试剂 盒中包括：

标准分子，所述标准分子中含有SEQIDNO.:1所示的多核苷酸；

优选地，所述试剂盒中还包括引物序列，所述引物序列用于特异性扩增SEQ IDNO.:1所示的序列，所述引物序列选自下组：

(1)SEQIDNO.:3和SEQIDNO.:4所示的引物序列；

(2)SEQIDNO.:5和SEQIDNO.:6所示的引物序列；

(3)SEQIDNO.:7和SEQIDNO.:8所示的引物序列；和

(4)SEQIDNO.:9和SEQIDNO.:10所示的引物序列。

2.一种分离的多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸的序列选自下组：

(a)序列如SEQIDNO.:1所示的多核苷酸序列；

(b)核苷酸序列与SEQIDNO.:1所示序列的同源性≥95％(较佳地≥98％) 的多核苷酸序列；

(c)序列与SEQIDNO.:1所示多核苷酸完全匹配或完全互补并且长度为 为SEQIDNO.:1所示序列长度的20％-100％(较佳地50％-100％，更佳地80％ -100％，最佳地90％-100％，如95％)的多核苷酸序列；

(d)与(a)-(c)任一所述的多核苷酸序列互补的多核苷酸序列。

3.一种分离的DNA构建物，其特征在于，所述DNA构建物中包含权利要 求2所述的多核苷酸，以及任选的标签序列、酶切序列、启动子序列和/或载体 序列。

4.如权利要求3所述的DNA构建物，其特征在于，所述DNA构建物为线性 DNA构建物或环状DNA构建物；优选地所述DNA构建物为质粒或表达载体；更 优选地，所述质粒或表达载体的序列如SEQIDNO:2所示。

5.一种试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中包括权利要求2所述多核苷酸 或者权利要求3所述的DNA构建物。

6.如权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中还包括引物对， 所述引物对特异性扩增MRSA的mecA基因序列；优选地特异性扩增MRSA的 mecA基因序列的所述的引物对选自下组：

SEQIDNO.:3和SEQIDNO.:4所示的引物对；

SEQIDNO.:5和SEQIDNO.:6所示的引物对；

SEQIDNO.:7和SEQIDNO.:8所示的引物对；和

SEQIDNO.:9和SEQIDNO.:10所示的引物对。

7.如权利要求2所述的多核苷酸、权利要求3所述的DNA构建物、或权利 要求5所述的试剂盒的用途，其特征在于，用于MRSA的检测。

8.一种MRSA实时荧光定量PCR检测方法，其特征在于，所采用的标准物 质是如权利要求2所述的多核苷酸或权利要求3所述的DNA构建物。

9.一种多核苷酸产品，其特征在于，所述产品包括：

(i)MRSA标准品，所述的标准品选自：权利要求2所述多核苷酸或者权利 要求3所述DNA构建物；

(ii)特异性扩增MRSA的mecA基因序列的引物对，所述引物对为：

SEQIDNO.:3和SEQIDNO.:4所示的序列构成的引物对。

10.一种MRSA检测的质粒标准分子的制备方法，其特征在于，包括以下 步骤：

①人工合成MRSA的mecA基因序列，所述的MRSA的mecA基因序列如SEQ IDNO.:1所示；

②将步骤①所得基因序列克隆至克隆载体上，得到MRSA检测的质粒标准 分子；

优选地，步骤②所述克隆载体为pUC19，pUC18，pUC118，pUC119， pBlueScriptIISK或pGEM。