[发明专利]一种环糊精色谱固定相的制备方法

权利要求书

1.一种环糊精色谱固定相的制备方法，步骤如下：

（1）合成ADIBO修饰的硅烷试剂，以硅胶为基质，然后将ADIBO修饰后的硅烷试剂偶联固定在硅胶固定相表面，得到末端含有八元环炔基官能团的硅胶材料；

其中，硅胶经过预处理，具体的处理方法为：硅胶加入体积浓度为1～36 % 的盐酸或硝酸溶液中，加热回流搅拌1～48 h，过滤，水洗至中性，在100～160 ^oC 干燥6～10 h,至恒重；硅烷试剂为烷氧基硅烷选自环氧基三甲氧基硅烷，氨基丙基三乙氧基硅烷，异氰基丙基三甲氧基硅烷或三乙氧基硅烷中的一种或两种以上；

（2）使用活化试剂活化环糊精的羟基，然后将活化的环糊精和叠氮化试剂反应，得到叠氮官能团化的环糊精；

或，将叠氮官能团化的环糊精再次用衍生化试剂衍生，得到衍生化的叠氮基环糊精；

（3）不加任何催化剂的条件下，将上述末端含有八元环炔基官能团的硅胶材料，与含有叠氮官能团化的环糊精或者衍生化的叠氮基环糊精发生click扩环反应，制备得到SPAAC类型的环糊精色谱固定相。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：

a. 硅胶预处理：硅胶加入体积浓度为1～36 % 的盐酸或硝酸溶液中，加热回流搅拌1～48 h，过滤，水洗至中性，在100～160 ^oC 干燥6～10 h, 然后在 80 ^oC干燥6～10 h至恒重；

b. ADIBO 双官能团试剂的制备：通过化学合成的方法合成ADIBO系列试剂，其结构特征：炔基和叠氮官能团反应，且含有容易发生亲核加成的官能团，具体为氨基，羧基，醛基，异氰基；ADIBO 双官能团试剂结构式如下：

c. ADIBO修饰硅烷试剂的制备：惰气保护下，室温，ADIBO试剂加入烷氧基硅烷试剂的极性有机溶液中，电磁搅拌4～6 h，得到末端含有八元环炔基的硅烷试剂；

d. ADIBO 键合在硅胶固定相表面：惰气保护，将步骤a处理好的硅胶溶于有机溶剂中，加入步骤c得到的ADIBO修饰硅烷试剂，加热回流，反应16~48 h；反应体系冷却至室温，减压过滤，依次用甲苯，四氢呋喃，甲醇，水，甲醇洗涤，固体产品在60～100 ^oC下干燥12～24 h，得到末端含有八元环炔基官能团的硅胶材料；e. 叠氮官能团化的环糊精的制备：首先将环糊精和活化试剂反应，然后将活化后的环糊精试剂和叠氮化钠反应，得到叠氮官能团化的环糊精；

f.衍生化的叠氮基环糊精的制备：室温，无水二氯甲烷为溶剂，向叠氮

官能团化的环糊精试剂中加入衍生化试剂，维持反应温度40～90 ^oC，搅拌24h, 停止反应，抽滤，水洗涤，水重结晶，搅拌48h, 过滤，水洗，甲醇洗，并用水重结晶，得到衍生化的叠氮基环糊精；

g. 将上述d中得到的末端含有八元环炔基官能团的硅胶材料加入甲醇水溶液中，缓慢加入上述e中得到的叠氮官能团化的环糊精或者f中得到的衍生化的叠氮基环糊精，室温搅拌，反应1~8 h；然后加入含有叠氮官能团的试剂，用于封闭没有反应的炔基官能团，反应1~6 h；停止搅拌，减压过滤，依次用甲醇，水，甲醇洗涤，在60～100 ^oC，干燥12～24 h，得到环糊精色谱固定相。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：

步骤c:硅烷试剂为末端含有环氧基,氨基，卤素，甲磺酰氯中的一种或二种以上官能团的三甲氧基硅烷或者三乙氧基硅烷中的一种或二种以上，硅烷试剂在极性溶剂中质量浓度为1～10%，硅烷试剂和ADIBO试剂的物质的量比为1/0.5～1/5, 用三乙胺控制溶液体系的pH值为7～9，搅拌，用液相色谱和质谱联用的方法检测ADIBO修饰硅烷试剂的反应进行程度。

4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：

步骤d中：所述有机溶剂为苯、甲苯、THF、DMF或者DMSO中的一种或二种以上，步骤a处理好的每克硅胶需要有机溶剂的体积为2～20 mL；

步骤d中：每克步骤a处理好的硅胶对应于步骤c中使用的经过ADIBO修饰的硅烷试剂的量为0.5 mmol～5.0 mmol。