[发明专利]一种从甜叶菊中提取高纯度甜叶菊糖苷的方法

说明书

一种从甜叶菊中提取高纯度甜叶菊糖苷的方法，包括以下步骤：（1）将甜叶菊原料粉碎后浸泡于水中，加入纤维素酶制剂进行酶解；（2）加热浸提，离心，过滤，得甜叶菊加酶浸提液；（3）将甜叶菊加酶浸提液水浴加热，加入无机盐絮凝剂，搅拌，絮凝处理，离心，过滤，得甜叶菊除杂液；（4）将甜叶菊除杂液过大孔吸附树脂柱进行脱色吸附，洗脱液洗脱，纳滤，浓缩，得甜叶菊浓缩液；（5）将甜叶菊浓缩液上硅胶层析柱，洗脱，收集各馏分，浓缩和干燥，得多种高纯度的甜叶菊糖苷产品。按照本发明方法所得产品纯度可高达98.4%，最终收率＞90%；乙醇、乙酯残留量低，环保安全；本发明方法工艺简单，操作性强，能耗、成本低，适合工厂生产。

技术领域

本发明涉及一种提取高纯度甜叶菊糖苷的方法，具体涉及一种适用于工业生产的从甜叶菊中提取高纯度甜叶菊糖苷的方法。

背景技术

甜叶菊原产于巴拉圭的Amambay 及Mbaxacayu山脉，属糖科植物，整个生长期温度都在20 ℃以上，具有喜温性。1970年日本从巴西引进甜叶菊，开始驯化、栽培、制苷，同时进行毒理、食品检验等试验，并首先开发利用甜叶菊产品——甜叶菊糖苷。我国于1976年由从日本引种，试种，并获成功，80年代初向全国各地推广种植。

甜菊苷是一类主要存在于甜叶菊叶片中的四环二萜类衍生物，主要包括甜菊苷（Stevioside）、莱鲍迪苷A（Rebaudioside A），莱鲍迪苷B（Rebaudiosde B），莱鲍迪苷C（Rebaudioside C）等8种糖苷，其甜度大约是蔗糖的300倍。有研究表明，甜叶菊糖苷具有高甜度，低热量，无明显毒副作用的特点。它可抑制高血糖、高血压、并有消炎、抗肿瘤，止泻利尿以及协助免疫调节的作用。目前，南美、日本和中国已经把甜叶菊糖苷作为一种天然的甜味剂广泛应用于食品和饮料中。

现有甜叶菊糖苷的提取方法主要有蒸煮法、冷水浸泡法、发酵法、电解法、超声提取法等。蒸煮法、冷水浸泡法、超声提取法是工业上应用最广泛的一种方法，但其在提取甜叶菊糖苷的同时，也将大量的杂质提取了出来；而生物发酵法、电解法会在提取液中引入外来杂质，给后续工序的纯化分离带来困难。现有甜叶菊糖苷的纯化方法主要有制备色谱、有机溶剂萃取重结晶法等。工业制备色谱化投入大，操作难度大；而有机溶剂萃取重结晶法存在溶剂使用量大、产品收率低等缺陷。

CN101062077B公开了一种同时制备甜叶菊总甜菊苷和甜叶菊总黄酮的方法，是将甜叶菊干叶用有机溶剂提取，后用超临界流体萃取法、柱色谱法来获得高纯度甜菊苷产品。但是，由于其提取采用了有机溶剂法，成本高，且安全系数低，后期纯化分离采用超临界、柱色谱存在投资大、操作难度大等缺陷。

CN101805768B公开了一种高品质甜菊糖生物酶解提纯方法，是采用酶提，大孔树脂纯化，溶剂萃取，重结晶得到高纯度产品，且在结晶过程中大量使用无水乙醇。其缺陷是不适合工业规模化生产，收率低、成本高。

CN102199177A公开了一种纯天然高纯度甜菊糖的生产方法，是采用酶解后超声波连续逆流提取技术进行提取，然后用膜过滤来澄清物料，再用多功能模拟移动床分离系统进行吸附，乙醇洗脱，得到产品。但是，所得产品的纯度最高只能达到96%，且终产品单一，产品回收率低，不适合工业化生产。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是，克服现有技术存在的上述缺陷，提供一种工艺简单，能耗低，环保无污染，适宜工业化生产，产品收率高、纯度高的从甜叶菊中提取高纯度甜叶菊糖苷的方法。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案如下：一种从甜叶菊中提取高纯度甜叶菊糖苷的方法，包括以下步骤：

（1）加酶浸泡：将甜叶菊原料粉碎后浸泡于水中，加入纤维素酶制剂进行酶解，得甜叶菊酶解液；

（2）加热浸提：将步骤（1）所得甜叶菊酶解液加热浸提，冷却至室温，离心，过滤，得甜叶菊加酶浸提液；