[发明专利]一种肺癌检测质控品及其制备方法

说明书

本发明涉及一种肺癌检测质控品及其制备方法，属于临床检验学、病理学和生物技术领域。一种肺癌检测质控品，为肺癌细胞系H3122、肺癌细胞系H2228和肺癌细胞系H1299分别接种实验动物后生成的肿瘤组织的标本切片。本发明的创新点在于：本发明得到的肺癌异种瘤组织质控品可以长期保存在大多数的温度条件下，在室温和4℃环境保存两周后检测效果无变化，该质控品可以用于EQA和IQC，在将切片质控品作为EQA评估试验的质控品发放的时候，它可以在室温下无需冰袋进行邮寄并能长时间保存在‑20℃或者‑4℃条件下。

技术领域

本发明涉及一种肺癌检测质控品及其制备方法，尤指一种用于EML4-ALK融合基因临床常用方法检测的异种瘤组织福尔马林固定石蜡包埋的质控品及其制备方法，属于临床检验学、病理学和生物技术领域。

背景技术

非小细胞肺癌(NSCLC)约占肺癌总数的80％，虽然不断有新的治疗药物上市，其预后仍然很差。随着分子靶向治疗的不断发展，已发现针对表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)的分子靶向药物能够有效的治疗具有EGFR外显子突变的非吸烟肺腺癌患者。2007年，日本学者在肺腺癌患者中发现的一个亚群对EGFR-TKI治疗和传统化疗不敏感，该类亚群存在人类棘皮动物微管相关蛋白样4(EML4)和人类间变性淋巴瘤激酶(ALK)重排形成的融合基因，即EML4-ALK融合基因，提示其可能对ALK抑制剂敏感。

EML4-ALK融合基因位于2号染色体短臂上，其5'端为EML4片段，3'端为ALK片段，编码一个由1059个氨基酸组成的蛋白质。目前发现至少14种EML4-ALK的变异体，均为EML4的人不同外显子与ALK的20外显子相融合。例如：变种1(v1)，为EML4的13外显子与ALK的20外显子相连；变种2(v2)，为EML4的20外显子和ALK的20外显子相连；变种3的两个亚种，v3a为EML4的第6外显子和ALK的20外显子相连，v3b为EML4的第6外显子加上一个33bp的小片段再和ALK的20外显子相连，等等总共14个变种。

目前，对于EML4-ALK融合基因的检测方法主要有三种：RT-PCR、免疫组化(IHC)和荧光原位杂交方法(FISH)，这三种方法都较常用在EML4-ALK融合基因的临床检测当中。其中，RT-PCR检测的是RNA水平，IHC方法检测的是EML4-ALK融合基因表达蛋白的水平，而FISH方法检测的是靶DNA分子的水平。除了上述方法，Western blot、RACE-coupled PCR以及iAEP等方法也可用于EML4-ALK检测。随着检测技术的不断进展，很多医院都陆续开展了对于EML4-ALK融合基因的检测，各个临床实验室检测的方法各不相同，而对于EML4-ALK融合基因的标准化却鲜少提及。目前尚没有国内外文献报道关于EML4-ALK融合基因检测质量评价的文章，对于不同实验室检测性能情况的评价以及改善提高其检测的水平都迫在眉睫。

临床上对于EML4-ALK融合基因的检测包括FISH、RT-PCR和免疫组化三种常规方法，其中手工法免疫组化仅作为初筛手段，不能用作诊断，但对于其他方法可进行佐证。然而对于任意一种方法来说，一个好的质控品是保证检测准确度的关键。传统上的质控品倾向于使用肺癌患者的组织样本作为检测质控品，但是这种质控品来源局限，一致性较差，在应用的过程中存在较大的局限性。有机构曾经通过基因编辑方法利用细胞系制备了EML4-ALK融合基因的样本质控品，这种方法能够获得不同变种的EML4-ALK融合基因，但是制备过程中缺少组织结构间隙，不能完全类似与组织的情况。

发明内容

本发明要解决的第一个技术问题是提供一种能用于异种瘤组织EML4-ALK融合基因临床常用方法检测的质控品。

本发明要解决的另一个技术问题是提供异种瘤组织EML4-ALK融合基因临床常用方法检测质控品的制备方法。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种肺癌检测质控品，为肺癌细胞系H3122、肺癌细胞系H2228和肺癌细胞系H1299分别接种实验动物后生成的肿瘤组织的标本切片。