[发明专利]一种鉴定尖孢镰刀菌西瓜专化型生理小种的引物及其应用

权利要求书

1.一种鉴定尖孢镰刀菌西瓜专化型生理小种的引物组，其特征在于引物序列如下所示：

Fon-1：5′CGATTAGCGAAGACATTCACAAGACT 3′；

Fon-2：5′ACGGTCAAGAAGATGCAGGGTAAAGGT 3′；

SIX1-F：5′GTATCCCTCCGGATTTTGAGC 3′；

SIX1-R：5′AATAGAGCCTGCAAAGCATG 3′；

SIX6-F1：5′CTCTCCTGAACCATCAACTT 3′；

SIX6-R1：5′CAAGACCAGGTGTAGGCATT3′。

2.一种鉴定尖孢镰刀菌西瓜专化型生理小种的试剂盒，其特征在于含有权利要求1所述的引物组。

3.权利要求2所述试剂盒检测尖孢镰刀菌西瓜专化型生理小种的方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)提取尖孢镰刀菌西瓜专化型0号、1号和2号生理小种菌株DNA；

(2)以尖孢镰刀菌西瓜专化型0号、1号和2号生理小种总DNA为模板，以试剂盒所含引物组进行三对特异性引物扩增和三重PCR扩增反应；

(3)将扩增产物用1.0％的琼脂糖凝胶电泳检测。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于步骤(2)所述三重PCR扩增反应的体系和条件为：

PCR扩增程序为：94℃预变性2min；94℃变性30s，58℃退火30s，72℃延伸45s，30个循环；最后72℃延伸5min；12℃保温。