[发明专利]甘蓝型油菜sBnFCA-ε基因序列及制备方法和应用在审
| 申请号： | 201510887654.5 | 申请日： | 2015-12-04 |
| 公开（公告）号： | CN105316347A | 公开（公告）日： | 2016-02-10 |
| 发明（设计）人： | 罗玉秀;罗春燕;杜德志;赵志刚;李小安;姚艳梅;张生萍 | 申请（专利权）人： | 青海大学 |
| 主分类号： | C12N15/29 | 分类号： | C12N15/29;C12N15/10;C07K14/415;A01H5/00 |
| 代理公司： | 北京天奇智新知识产权代理有限公司 11340 | 代理人： | 李树志 |
| 地址： | 810016 青*** | 国省代码： | 青海;63 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 甘蓝 油菜 sbnfca 基因 序列 制备 方法 应用 | ||
1.一种甘蓝型油菜控制开花相关的可变剪接体sBnFCA-ε序列，其特征在于，该基因编码的氨基酸序列如SEQIDNO.2所示。
2.一种甘蓝型油菜控制开花相关的可变剪接体sBnFCA-ε序列，其特征在于，所述基因序列如SEQIDNO.1第1～2001位所示。
3.一种甘蓝型油菜控制开花相关的可变剪接体sBnFCA-ε序列，其特征在于，所述基因序列如SEQIDNO.1第1～1948位所示。
4.一种甘蓝型油菜控制开花相关的可变剪接体sBnFCA-ε序列，其特征在于，所述基因序列如SEQIDNO.1第1807～1980位所示。
5.一种甘蓝型油菜控制开花相关的可变剪接体sBnFCA-ε序列，其特征在于，所述基因序列如SEQIDNO.1第1928～2001位所示。
6.一种如权利要求1所述的可变剪接体sBnFCA-ε序列的克隆方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：
1)甘蓝型油菜组织总RNA的提取；
2)以拟南芥FCA的序列保守区作为种子序列，采用同源克隆的方法分离sBnFCA基因，用cDNA-AFLP技术分离花芽分化不同阶段表达的差异片段，将检索到的目标EST拼接组装成甘蓝型油菜的可变剪接体sBnFCA-ε序列；根据该序列，设计能够扩增出全长的基因特异引物；
如SEQIDNO.3所示的sBncFCA-5；
如SEQIDNO.4所示的sBncFCA-13；
如SEQIDNO.5所示的sBncFCA-14F；
3)以甘蓝型油菜组织RNA反转录得到的甘蓝型油菜cDNA为模板，利用所述基因特异引物sBnFCA-5，sBnFCA-13和sBnFCA-14F克隆出sBnFCA基因的全长cDNA序列：
如SEQIDNO.6所示的sBncFCA-5cDNA；
如SEQIDNO.7所示的sBncFCA-13cDNA；
如SEQIDNO.8所示的sBncFCA-14FcDNA。
7.一种如权利要求1所述的甘蓝型油菜控制开花相关的sBnFCA基因序列在制备甘蓝型油菜品种中的用途，其特征在于，所述用途为采用基因工程手段或者基因干扰方法，调控所述基因序列的表达水平，进而引起甘蓝型油菜开花调控机制的变化，获得开花时间不同的甘蓝型油菜品种。
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