[发明专利]一种NK细胞的诱导培养方法

权利要求书

1.一种NK细胞的诱导培养方法，其特征在于，包括：

步骤1、用X-VIVO 15培养液稀释Matrigel基质，于细胞培养容器中孵育包被，获得细胞三维培养载体；

步骤2、从外周血分离出单个核细胞并接种到步骤1中的载体中，同时补加IL-2、IL-15、IL-21以及OKT-3因子诱导培养，定期补液；

其中，所述X-VIVO 15培养液稀释Matrigel基质的比例为5:1，所述各因子的浓度为：

100～1000U/mL IL-2、10～100ng/mL IL-15、10～100ng/mL IL-21、50～100ng/mLOKT-3。

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤1为：

混匀Matrigel基质成匀浆状，用X-VIVO 15培养液按X-VIVO 15培养液：Matrigel基质＝5:1的体积比稀释Matrigel基质，将稀释的Matrigel基质包被于T75培养瓶中，室温下孵育1小时，用X-VIVO 15培养液冲洗，去除未结合的Matrigel基质，获得细胞三维培养载体。

3.根据权利要求1所述方法，其特征在于，从外周血分离出单个核细胞具体为：

外周血加生理盐水稀释，加入到淋巴分离液上层，离心，然后用巴氏吸管吸取单个核细胞，清洗、离心、重悬，分离得到单个核细胞悬液。

4.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述诱导培养为在37℃、5％二氧化碳的环境中培养14天。

5.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述单个核细胞的接种数量为2×10⁷cell。