[发明专利]重组Ad-TNFR2 shRNA腺病毒及其构建和应用在审
申请号: | 201510899024.X | 申请日: | 2015-12-09 |
公开(公告)号: | CN105349501A | 公开(公告)日: | 2016-02-24 |
发明(设计)人: | 王志华;张宇;侯苗苗;赵欣;秦霞;王媛;马洋;秦国华;代杰琼;贾欣;陈晋源;陈建鸣;张策 | 申请(专利权)人: | 山西医科大学 |
主分类号: | C12N7/01 | 分类号: | C12N7/01;C12N15/861;A61K48/00;A61P29/00 |
代理公司: | 太原华弈知识产权代理事务所 14108 | 代理人: | 李毅 |
地址: | 030001 *** | 国省代码: | 山西;14 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 重组 ad tnfr2 shrna 病毒 及其 构建 应用 | ||
1.重组Ad-TNFR2shRNA腺病毒,含有干扰TNFR2基因表达的siRNA,所述siRNA具有SEQIDNo.1所示的核苷酸序列。
2.根据权利要求1所述的重组Ad-TNFR2shRNA腺病毒,其中构建所述腺病毒所采用的穿梭质粒为pHBAd-U6-GFP。
3.根据权利要求2所述的重组Ad-TNFR2shRNA腺病毒,其中所述干扰TNFR2基因表达的siRNA连接于所述穿梭质粒的U6启动子之下。
4.根据权利要求2所述的重组Ad-TNFR2shRNA腺病毒,其中构建所述腺病毒所采用的骨架质粒为pHBAd-BHG。
5.根据权利要求2所述的重组Ad-TNFR2shRNA腺病毒,其中构建所述腺病毒所采用的包装细胞为293细胞。
6.一种重组Ad-TNFR2shRNA腺病毒的构建方法,设计SEQIDNo.1所示核苷酸序列的siRNA,化学合成对应的SEQIDNo.2和SEQIDNo.3所示的shRNA互补单链目的基因片段,退火得到所述目的基因片段的双链表达模版,与BamHI和EcoRI双酶切的载体pHBAd-U6-GFP连接构建腺病毒穿梭质粒,再将所述腺病毒穿梭质粒与骨架质粒pHBAd-BHG共转染293细胞,得到重组腺病毒Ad-TNFR2shRNA。
7.权利要求1所述重组Ad-TNFR2shRNA腺病毒作为阻断/减少TNFR2表达的工具药的应用。
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