[发明专利]一种应用于核酸扩增体系的冻干保护剂在审
| 申请号： | 201510907693.7 | 申请日： | 2015-12-09 |
| 公开（公告）号： | CN105349529A | 公开（公告）日： | 2016-02-24 |
| 发明（设计）人： | 吴凯;李丹;程亮;王宝中;张琳 | 申请（专利权）人： | 江苏正大天创生物工程有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人： | 汤东凤 |
| 地址： | 225300 江苏省泰州市中国医药*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 应用于 核酸 扩增 体系 保护 | ||
1.一种应用于核酸扩增体系的冻干保护剂，其特征在于，包括以下组份中的一种或多种：海藻糖、焦磷酸二乙酯处理过的水。
2.根据权利要求1所述应用于核酸扩增体系的冻干保护剂，其特征在于，所述核酸扩增体系的冻干保护剂进一步包括以下组分：蔗糖和/或乳糖。
3.根据权利要求1或2所述应用于核酸扩增体系的冻干保护剂，其特征在于，所述核酸扩增体系的冻干保护剂不包括甘露醇。
4.一种如权利要求1-3中任一项所述应用于核酸扩增体系的冻干保护剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将所述组份按照使用的浓度比混匀，即得到冻干保护剂。
5.一种如权利要求1-3中任一项所述应用于核酸扩增体系的冻干保护剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1：将所述组份按照使用的浓度比混匀；
步骤2：冷冻干燥，即得到冻干保护剂。
6.根据权利要求5所述应用于核酸扩增体系的冻干保护剂的制备方法，其特征在于，所述冷冻干燥的步骤，进一步包括以下子步骤：
子步骤1：干燥的步骤；
子步骤2：冻干的步骤；
所述子步骤1中，冻干剂和核酸扩增反应试剂的体积比为3.5-7：13-16.5，所述核酸扩增反应试剂为RNA或DNA实时荧光定量PCR反应试剂；
所述子步骤1中，所述干燥的步骤采用冷冻真空干燥；
所述步骤2中，所述冻干的方法包括以下阶段：
预冻阶段：隔板温度下降到-45℃－-55℃，保持时间3-5h；
一次升华阶段：保持2-4h；
二次升华阶段：保持2-4h；
终干燥阶段：保持2-3h。
7.一种如权利要求1-3中任一项所述应用于核酸扩增体系的冻干保护剂的使用方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1：将用于核酸扩增体系的酶混合液、核酸扩增反应液、低温冻干保护液将按照对应的浓度比混匀，即得到用于核酸扩增体系的组合物；
步骤2：冷冻干燥，即得到冻干状态的用于核酸扩增体系的组合物。
8.根据权利要求7所述应用于核酸扩增体系的冻干保护剂的使用方法，其特征在于，所述冷冻干燥的步骤，进一步包括以下子步骤：
子步骤1：干燥的步骤；
子步骤2：冻干的步骤；
所述子步骤1中，冻干剂和核酸扩增反应试剂的体积比为3.5-7：13-16.5，所述核酸扩增反应试剂为RNA或DNA实时荧光定量PCR反应试剂；
所述子步骤1中，所述干燥的步骤采用冷冻真空干燥；
所述步骤2中，所述冻干的方法包括以下阶段：
预冻阶段：隔板温度下降到-45℃－-55℃，保持时间3-5h；
一次升华阶段：保持2-4h；
二次升华阶段：保持2-4h；
终干燥阶段：保持2-3h。
9.一种包括如权利要求1-3中任一项所述应用于核酸扩增体系的冻干保护剂的检测试剂盒，其特征在于：所述检测试剂盒能够在常温下运输和/或保存。
10.一种如权利要求1-3中任一项所述应用于核酸扩增体系的冻干保护剂和/或如权利要求4-6中任一项所述应用于核酸扩增体系的冻干保护剂的制备方法和/或如权利要求7-8中任一项所述应用于核酸扩增体系的冻干保护剂的使用方法，在核酸扩增体系的制备及使用中的应用。
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