[发明专利]缬氨霉素B及制备和医药用途

权利要求书

1.一种抗胶质瘤活性物质缬氨霉素B的制备方法，其特征在于，通过以下步骤实现：

(1)小链霉菌P11-23B发酵菌液的制备：

取小链霉菌P11-23B的菌落接种到含有一定量的液体菌种培养基的大三角烧瓶中，将含有P11-23B菌种的培养液在室温条件下振荡培养一定时间后以制备菌种液，最后将菌种液转入含有一定量的液体发酵培养基的大三角烧瓶，在室温条件下振荡发酵培养一定时间后，得到具有抗肿瘤活性的P11-23B的发酵菌液；

所述的液体菌种培养基和液体发酵培养基均为液体高氏培养基；所述的用量为100-200mL；所述的大三角培养瓶为250或500mL；所述的室温培养温度为20～30℃；所述的振荡的转速为160-180rpm；所述的培养时间为5～15天；

(2)缬氨霉素B的提取分离纯化

菌株P11-23B的发酵菌液用乙酸乙酯萃取得到乙酸乙酯萃取物，乙酸乙酯萃取物用十八烷基硅烷键合硅胶柱层析分离，分别用70％和100％的甲醇洗脱，100％的甲醇洗脱液合并后经减压浓缩得到的残留物用HPLC分离，得到纯化合物缬氨霉素B；

所述柱层析的十八烷基硅烷键合硅胶用量与上量的样品量比例是40～60g：1.0g；所述的高效液相分离条件是:Agilent 1260高效液相色谱仪，Agilent 1260 DAD检测器，Agilent Zorbax SB-C₁₈色谱柱250×9.4mm,5μm，100％甲醇为流动相，柱温26℃,检测波长210nm，流速为1.0mL/min；

(3)缬氨霉素B的结构鉴定：

根据一维和二维的NMR光谱、高分辨质谱数据、以及化学降解方法鉴定缬氨霉素B的结构。