[发明专利]一种鹿茸多肽的分离方法在审
| 申请号： | 201510914036.5 | 申请日： | 2016-05-25 |
| 公开（公告）号： | CN107434818A | 公开（公告）日： | 2017-12-05 |
| 发明（设计）人： | 不公告发明人 | 申请（专利权）人： | 新疆厚拾生物科技有限责任公司 |
| 主分类号： | C07K1/14 | 分类号： | C07K1/14;C07K1/16;C07K1/20 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 841001 新疆维吾尔自治区巴音郭*** | 国省代码： | 新疆;65 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 鹿茸 多肽 分离 方法 | ||
1.一种鹿茸多肽分离纯化的方法，其特征在于，所述方法包括：
A 将冲洗后的鲜鹿茸粉碎，并添加匀浆液；
B 将添加匀浆液后的鲜鹿茸粉进行离心处理，取上清液，真空旋转蒸发得到鹿茸浓缩液，并将鹿茸浓缩液冻干得到鹿茸提取物；
C对鹿茸提取物进行溶解，并对溶解后的鹿茸提取物进行层析，得到活性峰洗脱液，冻干；
D将所述冻干的活性峰洗脱液进行层析，收集活性峰并冻干；
E 对所述步骤D中的活性峰进行反相高相液相层析，并收集活性峰，冻干，得到纯化的鹿茸多肽。
2.根据权利要求1所述的鹿茸多肽分离纯化的方法，其特征在于，所述步骤A中匀浆液为PH3.5 的冰醋酸水溶液。
3.根据权利要求1所述的鹿茸多肽分离纯化的方法，其特征在于，所述步骤B具体包括：将匀浆液以8000rpm进行离心25min，取上清液；
在上清液中加入96%的乙醇使其浓度达到70%，并在5℃条件下存放3小时后进行离心处理，提取上清液，对提取的上清液真空旋转蒸发至浓缩液，冻干得到鹿茸提取物。
4.根据权利要求1所述的鹿茸多肽分离纯化的方法，其特征在于，所述步骤C具体包括：
以PH4.5 HAc-NaAc 缓冲液充分平衡，以3ml/min 流速将[a1] 加入柱内，并以12ml/min 的流速分别用PH4.5 HAc-NaAc 缓冲液、PH5.0 HAc-NaAc 缓冲液洗脱，收集活性峰洗脱液；
将洗脱液用透析袋透析，并冻干。
5.根据权利要求1所述的鹿茸多肽分离纯化的方法，其特征在于，所述步骤D具体包括：用PH5.0 的HAc-NaAc 缓冲液溶解；
装填PH5.0的 HAc-NaAc 缓冲液充分平衡，将[a2] 加入柱内，用PH5.0的HAc-NaAc 缓冲液洗脱，流速为 2ml/min收集活性峰，并冻干。
6.根据权利要求1所述的鹿茸多肽分离纯化的方法，其特征在于，所述步骤E具体包括：用蒸馏水溶解冻干品，并过滤，用异丙醇和水充分平衡，其异丙醇和水的比例为0.42：0.7，进样量为 15mg/ml 0.1ml，洗脱，流速为 2ml/min，检测波长为 280nm；收集活性峰，冻干。
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