[发明专利]水稻恢复系杂交后代产量性状一般配合力的快速鉴定方法

权利要求书

1.与水稻恢复系产量性状一般配合力紧密连锁的SSR分子标记，其特征在于，所述SSR分子标记为RM508和RM587，两个SSR分子标记位于水稻第6号染色体上；

用于PCR扩增标记RM508的引物对I为：

正向引物：5′-GGATAGATCATGTGTGGGGG-3′

反向引物：5′-ACCCGTGAACCACAAAGAAC-3′

扩增产物中含有重复基序：(AG)₁₇；退火温度：55℃；扩增产物大小：235bp；

用于PCR扩增标记RM587的引物对II为：

正向引物：5′-ACGCGAACAAATTAACAGCC-3′

反向引物：5′-CTTTGCTACCAGTAGATCCAGC-3′

扩增产物中含有重复基序：(CTT)₁₈；退火温度：55℃；扩增产物大小：217bp。

2.水稻恢复系杂交后代产量性状一般配合力的快速鉴定方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)提取待测水稻的基因组DNA；

2)以待测水稻的基因组DNA为模板，利用扩增权利要求1所述SSR分子标记的引物对I和/或引物对II，进行PCR扩增反应；

3)检测PCR扩增产物，如果扩增产物具有与蜀恢527相同的特征条带，则判定待测水稻具备高一般配合力，如果扩增产物具有与蜀恢527不同的带型，则判定待测水稻不具备高一般配合力。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤1)中采用CTAB法提取水稻的基因组DNA，在苗期，每个株系混取10株叶片用于DNA提取。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤2)中PCR反应体系如下：DNA模板5μl，dNTP2μl，TB缓冲液2μl，正、反向引物各2μl，TaqDNA聚合酶0.5μl，ddH₂O补足至20μl；反应程序如下：95℃预变性5min；95℃变性45s，55℃-67℃退火45s，72℃延伸1min，35个循环；72℃延伸10min；4℃保存。

5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤3)中用8％非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测PCR扩增产物。

6.根据权利要求2-5任一项所述的方法，其特征在于，所述水稻恢复系杂交后代的构建方法如下：以水稻恢复系蜀恢527作为轮回亲本，选择用于改良轮回亲本的优良供体亲本；利用轮回亲本与供体亲本杂交并与轮回亲本回交，获得高代回交群体；对高代回交群体进行产量性状初步筛选，获得产量选择导入系；利用产量选择导入系与生产上广泛使用的不育系杂交，获得杂交种群体，即得。

7.权利要求1所述SSR分子标记在水稻分子标记辅助育种中的应用。