[发明专利]一种产酸屎肠球菌、抑菌微生态制剂及其应用

权利要求书

1.一种产酸屎肠球菌CE001(Enterococcusfaecium)，其特征在于，所述屎肠球菌的菌种保藏编号为：CGMCCNO.9666。

2.一种抑菌微生态制剂，其特征在于，所述抑菌微生态制剂包括枯草芽孢杆菌所产细菌素和权利要求1所述的产酸屎肠球菌；所述细菌素与屎肠球菌的比例为1g细菌素比2～5亿屎肠球菌活菌数。

3.一种权利要求2所述抑菌微生态制剂的制备方法，包括以下步骤：

1)将制备的枯草芽孢杆菌所产细菌素按比例加入到发酵后期的屎肠球菌发酵液中，搅拌混合均匀；

2)将混合后的发酵液固液分离获得菌泥，在菌泥中加入干燥保护剂，所述菌泥与干燥保护剂的质量体积比(g/L)为5％～25％，采用制粒、冻干或喷雾干燥制成抑菌微生态制剂。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述细菌素的制备包括以下步骤：

1)将枯草芽孢杆菌菌株接种到发酵用培养液中，在30～39℃条件下，培养40～50h，得到发酵液；

2)将发酵液经5000～12000r/m离心5-30min中取上清液，在上清液中缓慢加入硫酸铵固体粉末进行盐析，边加边搅拌，直到饱和度达20％～80％，然后在4～5℃条件下静置4～12h，再在4～5℃条件下、以5000～12000r/m转速离心10～30min，弃去上清液得到细菌素。

5.根据权利要求3或4所述的制备方法，其特征在于，所述屎肠球菌发酵液的制备方法包括以下步骤：

1)在种子培养基中，35～45℃有氧或兼性条件下培养屎肠球菌18～24小时，成为一级种子；

2)将一级种子液接种在种子罐中进行扩大培养，在35～45℃有氧或兼性条件下培养18～24小时，成为二级种子；

3)将获得的二级种子液接种在发酵罐中进行发酵培养，在30～45℃有氧或兼性条件下，采用定时或连续补料分批发酵方式培养18～36小时。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，步骤1)和2)使用MRS培养基为种子培养基。

7.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，步骤3)发酵采用改良的MRS培养基，所述改良的MRS培养基是在每升MRS培养基中加有大豆蛋白胨5～30g，葡萄糖1～10g，酵母粉1～10g，乙酸钠1～10g，柠檬酸二胺0.1～8g，Tween800.1～5g，磷酸氢二钾0.1～5g，硫酸镁0.05～lg，硫酸锰0.001～0.2g，碳酸钙1～30g，纯净水1升，调节pH值至5.5～7.5。

8.权利要求1所述产酸屎肠球菌在抑菌和饲料添加剂方面的应用。

9.权利要求2所述抑菌微生态制剂在抑菌和饲料添加剂方面的应用。