[发明专利]一种同时分析人基因组DNA 24个基因座的荧光标记复合扩增的试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种同时分析人基因组DNA 24个基因座的荧光标记复合扩增的试剂盒，其特征在于，所述的24个基因座为：D16S539、D6S477、D15S659、D10S1248、D1S1656、D21S2055、D4S2366、D2S441、D3S1744、D22-GATA198B05、D3S3045、D11S2368、D17S1290、D10S2325、D14S608、D8S1132、D7S3048、D5S2500、D7S1517、D18S535、D10S1435、D13S325、D19S253及性别基因座Amelogenin；所述24个基因座对应的引物及其浓度为：D16S539 SEQ ID NO.1~20.03μM、D6S477 SEQ ID NO.3~4 0.03μM、D15S659 SEQ ID NO.5~6 0.06μM、D10S1248 SEQID NO.7~8 0.04μM、D1S1656 SEQ ID NO.9~10 0.03μM、D21S2055 SEQ ID NO.11~12 0.06μM、D4S2366 SEQ ID NO.13~14 0.05μM、D2S441 SEQ ID NO.15~16 0.05μM、D3S1744 SEQ IDNO.17~18 0.04μM、D22-GATA198B05 SEQ ID NO.19~20 0.08μM、D3S3045 SEQ ID NO.21~220.04μM、D11S2368 SEQ ID NO.23~24 0.04μM、D17S1290 SEQ ID NO.25~26 0.05μM、D10S2325 SEQ ID NO.27~28 0.10μM、D14S608 SEQ ID NO.29~30 0.08μM、D8S1132 SEQ IDNO.31~32 0.12μM、D7S3048 SEQ ID NO.33~34 0.15μM、D5S2500 SEQ ID NO.35~36 0.15μM、D7S1517 SEQ ID NO.37~38 0.15μM、D18S535 SEQ ID NO.39~40 0.15μM、D10S1435 SEQID NO.41~42 0.2μM、D13S325 SEQ ID NO.43~44 0.2μM、D19S253 SEQ ID NO.45~46 0.2μM、性别基因座Amelogenin SEQ ID NO.47~48 0.04μM。

2.根据权利要求1所述的同时分析人基因组DNA 24个基因座的荧光标记复合扩增的试剂盒，其特征在于，还包括反应混合物、基因组DNA、热启动Taq酶和sdH₂O，所述的反应混合物为：MgCl₂ 7.5mM,Tris-HCl buffer 125mM,KCl 125mM,dNTPs 7.5mM,BSA 2mg/mL。

3.根据权利要求2所述的同时分析人基因组DNA 24个基因座的荧光标记复合扩增的试剂盒，其特征在于，所述的每个基因座对应的引物中至少有一个引物的5’端进行荧光染料标记。

4.根据权利要求3所述的同时分析人基因组DNA 24个基因座的荧光标记复合扩增的试剂盒，其特征在于，将24个基因座分组进行荧光染料标记，具体为：D16S539、D6S477、D15S659、D10S1248、D1S1656和D21S2055为第一组，D4S2366、D2S441、D3S1744、D22-GATA198B05、D3S3045、D11S2368和D17S1290为第二组，D10S2325、D14S608、D8S1132、D7S3048、D5S2500，以及性别基因座Amelogenin为第三组，D7S1517、D18S535、D10S1435、D13S325和D19S253为第四组，各组荧光标记物互不相同。

5.根据权利要求3所述的同时分析人基因组DNA 24个基因座的荧光标记复合扩增的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒的扩增体系为：反应混合物 10.0μL，基因组DNA 0. 125-5ng，引物混合物 5μL，热启动Taq酶0.5μL，sdH2O补足至25.0μL。