[发明专利]用于在真菌细胞中表达基因的启动子在审
| 申请号： | 201510919712.8 | 申请日： | 2011-11-30 |
| 公开（公告）号： | CN105420267A | 公开（公告）日： | 2016-03-23 |
| 发明（设计）人： | M.卡特利特;D.雅弗 | 申请（专利权）人： | 诺维信股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/80 | 分类号： | C12N15/80;C12N1/15;C12N1/19;C12N15/113 |
| 代理公司： | 北京坤瑞律师事务所 11494 | 代理人： | 史悦 |
| 地址： | 美国加利*** | 国省代码： | 美国;US |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 真菌 细胞 表达 基因 启动子 | ||
1.一种产生多肽的方法，其包括：
(a)在有助于产生所述多肽的培养基中培养真菌宿主细胞，其中所述真菌宿主细胞包含编码多肽的多核苷酸，所述多核苷酸可操作地连接于启动子，所述启动子由与SEQIDNO:2,3,4,5,6,7或8具有95％,96％,97％,98％,99％或100％序列同一性的核苷酸序列组成；其中所述编码多肽的多核苷酸对于所述启动子是外源的；和
(b)从培养基分离所述多肽。
2.权利要求1的方法，其中所述真菌宿主细胞含有一个或多个拷贝的编码多肽的多核苷酸。
3.权利要求2的方法，其中所述真菌宿主细胞含有一个拷贝的编码多肽的多核苷酸。
4.权利要求1-3中任一项的方法，其中所述多肽选自下组：抗原、酶、生长因子、激素、免疫增强剂、神经递质、受体、报道蛋白、结构蛋白和转录因子。
5.权利要求1-3中任一项的方法，其中所述多肽对于真菌宿主细胞是天然的或外源的。
6.权利要求1-3中任一项的方法，其中所述多核苷酸包含于真菌宿主细胞的染色体中。
7.权利要求1的方法，其中所述多核苷酸包含于染色体外元件上。
8.权利要求1-3中任一项的方法，其中所述真菌宿主细胞是丝状真菌细胞。
9.权利要求1-3中任一项的方法，其中所述真菌宿主细胞是酵母细胞。
10.一种分离的启动子，其由与SEQIDNO:2,3,4,5,6,7或8具有95％,96％,97％,98％,99％或100％序列同一性的核苷酸序列组成。
11.一种核酸构建体，其包含可操作地连接于权利要求10的启动子的编码多肽的多核苷酸。
12.一种重组表达载体，其包含权利要求11的核酸构建体。
13.一种重组宿主细胞，其包含权利要求11的核酸构建体。
14.权利要求13的重组宿主细胞，其为丝状真菌细胞。
15.权利要求13的重组宿主细胞，其为酵母细胞。
16.一种核酸构建体，其包含：(a)靶向序列，(b)权利要求10的启动子，(c)外显子，和(d)剪接-供体位点。
17.一种核酸构建体，其包含：(a)靶向序列，(b)权利要求10的启动子，(c)外显子，(d)剪接-供体位点，(e)内含子，和(f)剪接-受体位点，其中靶向序列指导元件(a)-(f)的整合而使得元件(b)-(f)可操作地连接于内源基因。
18.一种用于产生多肽的方法，其包括：
(a)在有助于产生所述多肽的条件下培养其中并入了转录单元的同源重组细胞，所述转录单元包含权利要求10的启动子，外显子，和/或剪接供体位点，其可操作地连接于编码所述多肽的内源多核苷酸的第二外显子，其中编码所述多肽的多核苷酸对于所述启动子是外源的；和
(b)回收所述多肽。
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